动物细胞培养-(唐丽灵老师)PPT.pptVIP

动物细胞培养;组织培养的分类及基本概念 ;培养细胞的形态 ;培养细胞的生长和增殖 ;培养细胞的传代培养 ;细胞培养的基本条件 ;细胞培养的基本条件;细胞培养的基本条件;6)其它添加成分： 缓冲系统，常用为HEPES（N’-2-hydroxy-ethylpiperazine-N’-ethanesulfonic acid），缓冲效能(pKa)在20℃时为7.55，37℃为7.31； HEPES起恒定和抵抗快速pH变化作用。 有机补充物，如丙酮酸钠， 谷胺酰氨等。 促细胞分裂因子，如生长因子类的FGF(成纤维细胞生长因子)，EGF(表皮生长因子)。 贴壁和铺展因子，如胶原蛋白，纤粘蛋白等。 可根据培养细胞的特殊要求进行添加。;培养液的物理性质 ;渗透压：培养液渗透压一般介于260~320 mosm/kg之间。 人类血浆渗透压290mosm /kg，小鼠类为310mosm /kg。 粘度：由于血清的存在，直接影响培养液粘度。 表面张力：培养液的表面张力有利于培养物粘着于底物上面。;细胞培养中应注意的几个问题 ;4）去除死细胞 5）温度控制：动物细胞培养对温度波动的敏感性很大。温度低于36.5℃，细胞生长缓慢；温度高于37.5℃，细胞存活力降低。;培养细胞的污染问题及检测 ;细胞间交叉污染;