分子生物学蛋白质生物合成PPT.ppt

分子生物学蛋白质生物合成PPT

  氨基酸活化:2个~P ATP 起始: 1个 GTP 延长: 2个 GTP 终止: 1个 GTP 结论:每合成一个肽键至少消耗4个~P。 原核生物蛋白质合成的能量计算 多聚核蛋白体的形成可以使蛋白质生物合成以高速度、高效率进行。 (四)多聚核蛋白体(polysome) 1条mRNA模板链都可附着10~100个核蛋白体,这些核蛋白体依次结合起始密码子并沿5′→3′方向读码移动,同时进行肽链合成,这种mRNA与多个核蛋白体形成的聚合物称为多聚核蛋白体(polysome) 。 多聚核蛋白体 多个核蛋白体聚集到同一mRNA上合成相同的多肽链,提高蛋白质的合成速率。 电镜下的多聚核蛋白体 二、真核生物的肽链合成过程 (一)起始 1. 核蛋白体大小亚基分离; 2. 起始氨基酰-tRNA的结合; 3. mRNA在小亚基定位结合; 4. 核蛋白体大亚基结合。 (起始复合物形成) 真核生物翻译起始因子 起始因子 生物功能 eIF-2 促进起始tRNA与小亚基结合 eIF-2B, eIF-3 促进大小亚基分离 eIF-4A eIF-4F复合物成分,有解螺旋酶活性,促进mRNA结合小亚基 eIF-4B 促进mRNA扫描定位起始AUG eIF-4E eIF-4F复合物成分,结合mRNA 5’帽子 eIF-4G eIF-4F复合物成分,结合eIF-4E和PAB eIF-5 促进各种起始因子从小亚基解离,进而结合大亚基 eIF-6 促进核蛋白体分离成大小亚基 Met 40S Met Met 40S 60S mRNA eIF-2B、eIF-3、 eIF-6 ① elF-3 ② GDP+Pi 各种elF释放 elF-5 ④ ATP ADP+Pi elF4E, elF4G, elF4A, elF4B,PAB ③ 真核生物翻译起始复合物形成过程 Met-tRNAiMet-elF-2 -GTP Met 60S 真核生物翻译起始的特点 核蛋白体是80S; 起始因子种类多; 起始tRNA的Met不需甲酰化; mRNA的5’帽子和3’poly A尾结构与mRNA在核蛋白体就位有关; 起始tRNA先与核蛋白体小亚基结合,然后再结合mRNA 真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似,但有不同的反应体系和延长因子。 另外,真核细胞核蛋白体没有E位,转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。 (二)延长 (三)终止 真核生物翻译终止过程与原核生物相似,但只有1个释放因子eRF,可识别所有终止密码子,完成原核生物各类RF的功能。 真核生物细胞质蛋白质合成特点 1、翻译启动因子多 2、mRNA为单作用子 3、核糖体大而复杂 4、启动tRNA不经过甲酰化 5、合成过程需要ATP ,启动因子种类多 6、肽链延长因子 终止因子种类少 1、真核细胞核糖体比原核细胞核糖体更大更复杂; 2、起始氨基酸为Met,不是fMet; 3、肽链合成的起始:由40S核糖体亚基首 先识别mRNA的5’端-帽子,然后沿mRNA移动寻找AUG; 4、起始因子有12种,但只有2种延长因子和1种终止因子; 5、真核细胞种线粒体、叶绿体的核糖体大小、组成及蛋白质合成过程都类似于原核细胞。 原核生物与真核生物肽链合成过程的主要差别 原核生物 真核生物 mRNA 一条mRNA编码几种蛋白质(多顺反子) 一条mRNA编码一种蛋白质(单顺反子) 转录后很少加工 转录后进行首尾修饰及剪接 转录、翻译和mRNA的降解可同时发生 mRNA在核内合成,加工后进入胞液,再作为模板指导翻译 核蛋白体 30S小亚基+50S大亚基 ? 70S核蛋白体 40S小亚基+60S大亚基 ? 80S核蛋白体 起始阶段 起始氨基酰-tRNA为fMet-tRNAfMet 起始氨基酰-tRNA为Met-tRNAiMet 核蛋白体小亚基先与mRNA结合,再与fMet-tRNAfMet结合 核蛋白体小亚基先与Met-tRNAiMet结合,再与mRNA结合 mRNA中的S-D序列与16S rRNA 3?-端的一段序列结合 mRNA中的帽子结构与帽子结合蛋白复合物结合 有3种IF参与起始复合物的形成 有至少10种eIF参与起始复合物的形成 延长阶段 延长因子为EF-Tu、EF-Ts和EF-G 延长因子为eEF-1α、eEF-1βγ和eEF-2 终止阶段 释放因子为RF-1、RF-2和RF-3 释放因子为eRF 第四节 蛋白质翻译后修饰和靶向输送 Posttranslational Modification and Targeting Transfer of Protein 新生多肽链不具备蛋白质的生物学活性,必须经过复杂的加工过程才

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