分子生物学课件5Ch5. Protein Synthesis and Protein ProcessingPPT.ppt

IF-3结合到30S亚基上，形成稳定的游离亚基， 使30S亚基特异的结合于mRNA的起始位点 形成IF-2?GTP? fMet-tRNAfMet 复合物 IF-2?GTP? fMet-tRNAfMet结合到30S亚基的P位点，识别 AUG，IF-2，3释放，50S亚基结合，形成完整的核糖体 其它aa-tRNA进入核糖体的A位点 fMet-tRNAfMet与第二个aa-tRNA形成肽键 肽酰转移酶 合成起始： 起始因子参与小亚基与大亚基的结合 只有fMet-tRNAfMet 与P位点结合，其余aa-tRNA 进入核糖体的A位点 蛋白质合成起始复合物的形成 Tu+Ts→ Tu ? Ts→ Tu ? GTP GTP aa-tRNA进入核糖体A位点 Tu ? GDP EF-G ? GTP 核糖体沿mRNA向前移动一个密码子， 使肽酰-tRNA由A位移动到P位 A位空缺，准备接受下一个aa-RNA 肽酰-tRNA的肽酰基转移到aa-tRNA上形成肽键 肽酰转移酶 延伸： 延 伸 因 子 的 循 环 延伸因子Tu(EF-Tu)的循环 蛋白质合成的延伸过程 肽键的形成和肽酰转移酶的作用 合成终止： 终止密码子——UAG、UAA、UGA 终止因子（释放因子）：RF-1 RF-2 终止密码子被RF识别，作用于A位点 肽酰-tRNA的肽酰基转移到aa-tRNA上， 多肽与tRNA断裂 核糖体从mRNA上解离下来 蛋白质合成的终止过程 三、真核生物蛋白质合成 特点： 1. 比原核需要更多的蛋白因子; 2. 40S亚基先与起始tRNA结合,再与mRNA结合; 3. mRNA5’帽子结构和二级结构具有重要作用. 40S eIF-1A、3、4A 60S eIF- 3 A Met-tRNAiMet ? GTP ? eIF-2 40S 40S 40S 40S 60S 合成起始 真核生物前40S起始复合物的形成 扫描模型：40S亚基携带着Met-tRNAiMet 及相应起始因子进入mRNA5’端，沿mRNA滑动，寻找第一个AUG，与60S亚基结合，形成第一个肽键。 识别第一个AUG时，往往需要上下文正确（AGNNAUGG），才能使40S亚基与mRNA结合稳定，再与60S亚基形成完整的核糖体。 真核生物蛋白质合成起始的扫描模式 mRNA 5’ cap 40S subunit M eIF2 AUG Initiator tRNA bound to the small ribosomal subunit with the eukaryotic initiation factor-2 (eIF2) Initiation of protein synthesis: mRNA binding The small subunit finds the 5’ cap and scans down the mRNA to the first AUG codon mRNA 5’ 40S subunit M eIF2 AUG the initiation codon is recognized eIF2 dissociates from the complex the large ribosomal subunit binds 60S subunit mRNA 5’ M AUG aminoacyl tRNA binds the A-site first peptide bond is formed initiation is complete GCC A mRNA 5’ M AUG GCC A 真核蛋白质合成起始模式 延伸： aa-tRNA结合于核糖体A位点 eEF-1α eEF-1α?GDP 形成肽键（肽酰转移酶） eEF-2?GTP 核糖体沿mRNA向前移动，A位空缺 P UCA P P P P P UCA GCA GGG UAG A P P P P Elongation GCA GGG UAG following peptide bond formation the uncharged tRNA dissociates from the P-site the ribosome shifts one codon along the mRNA, moving peptidyl tRNA from the A-site to the P-site; this translocation requires the elongation factor EF2 the next aminoacyl tRNA then binds within