酶学第八章酶的别构效应.docVIP

第八章 酶的别构效应 本章中将讨论一些不符合米氏方程的酶动力学，即非双曲线动力学。有些影响酶活性的效应剂（包括激活剂和抑制剂）作用于酶活性部位以外的部位，通过酶分子构象的改变来调节酶的活性。这种效应叫做别构效应（allosteric effects），这种效应剂叫做别构效应剂，受别构效应剂影响的酶叫别构酶（allosteric enzyme）。 8.1 别构酶与代谢调节 8.1.1 别构效应在代谢调节中的意义 生物体内的物质代谢都是在酶的直接作用下进行的，要使物质代谢协调有序地进行，酶活性必须根据情况适时地改变。利用别构效应调节酶活性是各种酶活性调节方式中最迅速的一种，大多数代谢物的反馈抑制就属于别构调节，也有一些代谢物可对代谢途径中的酶起别构激活作用。 8.1.1.1 别构抑制作用 反馈抑制可分为五种类型： 线性通路中的反馈抑制 一条途径的最终产物抑制途径中最初的酶活性。 趋同通路中的反馈抑制 为了有效地合成D，要求B和C的浓度大致相等。当C浓度大时，对产生B的途径的最初的酶有激活作用；当B浓度大时，对产生B的途径的最初的酶有抑制作用。 C．趋散通路中的反馈抑制 EC和ED为两种同工酶，分别受C和D的反馈抑制。当C太多时，不仅抑制从B到C的第一个酶，而且抑制从A到B的第一个反应两种同工酶中的一种，使得B合成的速率下降。B的合成不能完全停止，因为合成D还需要B。当D太多时情况相似。 D．顺序反馈抑制 一条途径中有多个反馈抑制步骤。 E．协调反馈抑制 需要多种代谢物共同作用才能发挥反馈抑制作用。 8.1.1.2 别构激活作用 当一种代谢物积累后，激活某些酶，从而加强别的代谢途径。如有氧呼吸旺盛时，ATP大量合成，AMP和ADP减少，由于AMP和ADP是异柠檬酸脱氢酶的激活剂，因此异柠檬酸和柠檬酸浓度增高，柠檬酸能激活乙酰CoA羧化酶和己糖激酶，同时抑制PFK（磷酸果糖激酶）。激活乙酰CoA羧化酶可增强脂肪酸的合成，激活己糖激酶且抑制PFK，可使G-6-P更多地进入磷酸戊糖途径，合成更多的NADPH，供脂肪酸合成使用。 8.2 别构酶的基本概念 8.2.1 一个典型的别构酶——天冬氨酸转氨甲酰酶 天冬氨酸转氨甲酰酶（aspartate transcarbamoylase, ATC）是嘧啶核苷酸生物合成途径的第一个酶（→ → → UTP → CTP）。ATC的活性受到CTP的强烈抑制，又受到ATP的高效激活（见下表）。在对照、加ATP、加CTP三种情况的[S]对V图中可以看出，对照呈S形曲线而不是双曲线；加ATP减小了反应的表观Km值，使曲线向双曲线靠近；加CTP增大了反应的表观Km值，使曲线的S形更加明显。加ATP和CTP并不影响Vm。 效应剂 抑制% 嘧啶族 胞嘧啶 0 胞嘧啶核苷 24 胞苷一磷酸（CMP） 38 胞苷二磷酸（CDP） 68 胞苷三磷酸（CTP） 86 尿苷三磷酸（UTP） 8 嘌呤族 鸟苷三磷酸（GTP） 35 腺苷三磷酸（ATP） －180（激活） 表 效应剂对天冬氨酸转氨甲酰酶活性的作用 为了解释这种现象，研究者设想在酶分子中有两个分开的部位，一个部位与底物结合并催化反应，另一个部位是ATP或CTP等效应剂的结合位点。利用选择性修饰法修饰后一个部位后，ATC的活性并不丧失，但对CTP抑制的敏感性下降，这种现象称为脱敏作用。选择性修饰实验证实了两个部位的设想。现在我们知道，ATC由12条多肽链组成，2个α3亚基，3个β2亚基。 根据对ATC的研究，得出了5点结论： 1．酶分子上有两个结合部位，结合底物并催化反应的部位叫活性部位，结合效应剂的部位叫别构部位或调节部位。 2．这两个部位能同时分别被底物和效应剂占据。 3．调节部位可与多种效应剂结合，并产生不同的效应。 4．效应剂的结合影响酶分子的构象，从而影响酶的着底物的结合能力和催化能力。 5．调节部位的效应是构成别构抑制或别构激活的基础，而后两者又是代谢调节的有效方式之一。 8.2.2 别构酶的协同效应 协同效应（cooperative effects）也是多亚基别构酶的一个特征。我们把能与酶结合的底物、激活剂和抑制剂统称为配体，所谓协同效应是指当一个配体与酶结合以后，可以促进或抑制另一个配体与酶的结合。 8.2.2.1 协同效应的分类 A．同种效应和异种效应 同种效应（homotropic effects）指的是一分子配体与酶结合后影响另一分子同种配体与酶的结合；异种效应（heterotropic effects）指的是一分子配体与酶结合后影响另一分子异种配体与酶的结合。 B．正协同和负协同 一分子配体与酶结合后促进另一分子配体与酶结合叫正协同（positive cooperation），抑制另一分子配体与酶结合叫负协同（n