生命科学导论-生物技术与人类未来2012-8PPT.ppt

第一节 生物技术及其发展历史 第二节 重组DNA技术─基因工程 第三节 蛋白质工程、发酵工程和细胞工程简介 第四节 生物技术在农业、医药等方面的应用 第五节 生物技术面临的问题与挑战 第六节 生物科技造福人类 ;第一节 生物技术及其发展历史;第一节;第一节;第二节 重组DNA技术─基因工程 ;第二节;限制性内切酶、载体和宿主菌。 限制性内切酶是从细菌中分离提纯的核酸内切酶，可以识别一小段特殊的核酸序列并将其在特定位点处切开。 载体是运送目的基因片段进入宿主细胞的工具，目前最常用的载体包括细菌质粒（如pUC18）、λ噬菌体、cosmid质粒等。 基因克隆过程是通过将携带目的基因的重组DNA分子转入到宿主细胞中来完成的。 酶切和电泳方法来检查克隆的基因，还可以利用DNA杂交的技术直接鉴定带有重组质粒的细菌克隆。 ;第二节;基因克隆以后使目的基因在合适的宿主细胞中表达，产生需要的基因表达产物或使宿主生物具备所需要的性状，同时，该外源目的基因还能在宿主细胞中稳定地遗传。这一过程就是遗传转化。 宿主细胞就是接纳外源DNA的细胞，它们可以是细菌等原核生物，也可以是植物或动物细胞。 ;基因的直接转移方法包括： 1）利用高压电脉冲的电激穿孔作用把外源DNA引入动植物细胞或组织中。 2）基因枪法，用粒子枪把表面吸附有外源DNA的金属微粒高速地射入动植物细胞或组织中。 3）微注射法，利用显微注射仪等将外源DNA直接注入细胞核或细胞质中。对于植物细胞，常用除去了细胞壁的原生质体为受体；对于动物细胞，常用的受体包括受精卵、胚胎干细胞等。 ;蛋白质工程就是在对蛋白质的化学、晶体学、动力学等结构与功能认识的基础上，对蛋白质人工改造与合成，最终获得商业化的产品。(在现阶段，蛋白质工程主要是改造和表达现有的蛋白质，包括通过修改氨基酸序列来改善蛋白质的结构或构象，以提高蛋白质的活性、稳定性和产率) 蛋白质工程的主要步骤通常包括：（1）分离纯化目的蛋白。（2）测定氨基酸序列。（3）测定蛋白质的结构。（4）了解蛋白质的结构变化对活性与功能的影响。（5）设计基因改造方案。（6）分离、纯化??蛋白，功能检测后投入实际使用。如通过引入二硫键提高酶的热稳定性。 ;现代发酵工程主要是指利用微生物、包括利用DNA重组技术改造过的微生物在全自动发酵罐或生物反应器中生产某种商品的技术。(发酵工程的产品从食品、药品、精细化工产品到许多工业用原料等，范围非常广泛) 现代发酵工程是分子生物学、生物代谢、微生物生长动力学、大型发酵罐或生物反应器研制、化工原理密切结合和应用的结果。 基本步骤：（1）菌种选育和改造获得工程菌等。（2）细胞大规模培养即发酵过程。（3）生产活性的诱导。（4）菌体及产物的收获，从细胞或培养液中分离纯化所需要的代谢产物。 ;细胞工程是指通过组织、细胞和细胞器水平上的筛选或改造，获得有商业价值的细胞株、细胞系或细胞组织，再通过规模培养，获得特殊商品的技术与过程。 动物细胞培养：体外培养可分为原代培养与继代培养。 动物细胞培养的操作步骤 包括： 1）对动物体的胚胎、肌肉、肾等组织经酶解消化分离出单个细胞。 2）将分散的细胞转入特殊培养液中，于二氧化碳培养箱中进行保温培养。 3）原代细胞分装到多个扁形的瓶中进行继代培养。 ;第三节;细胞融合将不同种类的细胞经特殊处理形成杂种细胞。 细胞重组是把不同种类细胞的细胞器重新组合装配，包括核移植、叶绿体移植、核糖体重建及线粒体装配等。 杂交瘤技术是通过细胞融合产生特异杂交瘤细胞，进而使杂交瘤细胞产生单一的抗体（单克隆抗体），在医药业用作药物和诊断试剂。 制备单克隆抗体的过程 涉及细胞培养、细胞融合等多种步骤。 单克隆抗体技术现已应用于临床诊断和疾病的治疗，在癌症的研究治疗中也具有应用潜力。;第四节 生物技术在农业、医药等方面的应用 ;第四节;第四节;第四节;第四节;第五节 生物技术面临的问题与挑战 ;第五节;第五节;第五节;第六节 生物科技造福人类;第六节;第六节;生物技术是“应用生物或来自生物体的物质制造或改进一种商品的技术，其还包括改良有重要经济价值的植物与动物以及利用微生物改良环境的技术”。高技术、高投入、高利润是生物技术产业的显著特点。生物技术通常包括基因工程、细胞工程、 发酵工程和蛋白质（酶）工程4个方面内容。  重组DNA技术是基因工程的核心技术。一般重组DNA操作通常包括：①获得目的基因。②与克隆载体连接形成重组DNA分子。③用重组DNA分子转化受体细胞。④对转化子进行筛选和鉴定。⑤对获得外源基因的细胞或生物体通过发酵、细胞培养、养殖或栽培等，最终获得所需要的遗传性状或表达出所需要的产物。获得目的基因的常用方法包括直接从生物体中提取总DNA，构建基因文库，从中调用目