生物化学第二章核酸的结构和功能PPT.ppt

第二章核酸的结构与功能;核 酸(nucleic acid) ;核酸;第一节 核酸的化学组成及其一级结构The Chemical Component and Primary Structure of Nucleic Acid;;嘌呤(purine，Pu) ;;戊糖:;DNA和RNA分子组成的区别:; ;核苷或脱氧核苷与磷酸通过酯键结合构成核苷酸(ribonucleotide)或脱氧核苷酸(deoxyribonucleotide)。;多磷酸核苷酸:;环化核苷酸：cAMP、cGMP，是细胞信号转导中的第二信使。; 概 念: 核苷酸在核酸分子中从5′端到3′端的排列顺序。;A ;第二节 DNA的空间结构与功能Dimensional Structure and Function of DNA;一、DNA的二级结构 ;碱基互补配对:胸腺嘧啶(T) /腺嘌呤 (A) ;;DNA双螺旋结构的多样性：;二、DNA的高级结构;（一）原核生物DNA的环状超螺旋结构;（二）真核生物DNA的超螺旋结构（高度有序和高度致密的结构）;DNA染色质呈现出的串珠样结构。 染色质的基本单位是核小体(nucleosome)。;;60bp;真核生物的染色体:; 1、DNA的基本功能是以基因的形式荷载遗传信息，并作为基因复制和转录的模板。 它是生命遗传的物质基础，也是个体生命活动的信息基础。;第三节 RNA的结构与功能;1、RNA与蛋白质共同负责基因的表达和表达过程的调控。 2、RNA通常以单链的形式存在，但局部有复杂的二级结构或三级结构。 3、RNA比DNA小的多。 4、RNA的种类、大小和结构远比DNA表现出多样性。;RNA的种类、分布、功能; 1、信使RNA(messenger RNA, mRNA)是合成蛋白质的模板。 2、核内不均一RNA(hnRNA)是mRNA的前体,含有内含子(intron)和外显子(exon),经过剪接后成为成熟的mRNA。 3、外显子是氨基酸的编码序列，内含子是非编码序列。 4、种类多(105种),含量少(占2~5%),寿命短。 ;; 1、成熟的mRNA由氨基酸编码区和非翻译区构成。 2、5?-末端帽子结构(cap)和3?-末端多聚A尾结构 。 3、编码区从AUG 开始，每三个核苷酸为一组编码称为三联体密码(codon)。 ; 大部分真核细胞mRNA的5末端都以7-甲基鸟嘌呤-三磷酸核苷为起始结构 ;;1、帮助mRNA从核内向胞质转运 2、参与翻译起始的调控 3、维系mRNA的稳定性;（三）mRN的作用 指导蛋白质合成过程氨基酸的排列顺序;转运RNA(tRNA)在蛋白质合成过程中作为各种氨???酸的载体, 将氨基酸转呈给mRNA。 由74～95核苷酸组成； 占细胞总RNA的15%； 具有很好的稳定性。;tRNA的局部具有茎环结构(三叶草形)或发卡结构。;;tRNA的3?-末端都是以CCA结尾。 3?-末端的A与氨基酸共价连结，tRNA作为氨基酸的载体。 不同的tRNA结合不同的氨基酸。 ;tRNA反密码子环上的反密码子依照碱基互补的原则识别mRNA上的密码子。;核蛋白体RNA(ribosomal RNA，rRNA)是细胞内含量最多的RNA(80％)。 rRNA与核蛋白体蛋白结合组成核蛋白体(ribosome)，为蛋白质的合成提供场所。;核蛋白体的组成:;;核内小RNA 核仁小RNA 胞质小RNA 催化性小RNA 小片段干涉 RNA ;核酸的理化性质 The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid;;1、DNA或RNA的定量 A260 = 1.0 相当于 50μg/ml 双链DNA(dsDNA) 40μg/ml 单链DNA (ssDNA or RNA) 20μg/ml 寡核苷酸 2、确定样品中核酸的纯度 纯 DNA: A260/A280 = 1.8 纯 RNA: A260/A280 = 2.0;二、DNA的变性;协同性的DNA解链;部分变性DNA的电镜图像:;;;;三、变性核酸的复性及分子杂交; 不同种类的DNA(RNA)单链放在同一溶液中，在适宜的条件可以在不同的分子间形成杂化双链(heteroduplex)，这种现象称为核酸分子杂交。 这种杂化双链可以在不同的DNA之间形成，也可以在DNA和RNA间或RNA与RNA之间形成。;;研究DNA分子中某一种基因的位置。 监定两种核酸分子间的序列