高效液相色谱法测的定补肾益气颗粒中补骨脂素和异补骨脂素含量.doc

高效液相色谱法测定补肾益气颗粒中补骨脂素和异补骨脂素含量 【关键词】nbsp; 补肾益气颗粒；,,补骨脂素；,,异补骨脂素；,,高效液相色谱法 　　摘要：目的建立补肾益气颗粒中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定方法。方法Diamonsil C18柱（200 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇水（55∶45），流速0.85 ml/min，检测波长245 nm。结果补骨脂素的线性范围为0.08～0.8 μg，r=0.999 98(n=6)，平均加样回收率为99.69％，RSD为2.27％;异补骨脂素的线性范围为0.079 6～0.796 μg，r=0.999 98(n=6)，平均加样回收率为100.25％，RSD为2.82％。结论 该法简便，准确，重现性好，可使补骨脂素和异补骨脂素达到基线分离， 可以控制补肾益气颗粒的质量。 　　关键词：补肾益气颗粒；nbsp; 补骨脂素；nbsp; 异补骨脂素；nbsp; 高效液相色谱法 　　　　Abstract：ObjectiveTo establish a method for the determination of psoralen and isopsoralen in Bushenyiqi granules.MethodsThe Diamonsil C18（200 mm×4.6 mm,5 μm）was used.The mobile phase consisted of methanol-water(55:45).The flow rate was 0.85 ml#12539;min-1.The UV detective wavelength was 245 nm.ResultsThe linear range of psoralen was 0.08～0.8 μg, r=0.999 98(n=6) with an average recovery rate ofnbsp; 99.69％(RSD=2.27％),the liner range of isopsoralen was 0.079 6～0.796μg，r=0.999 98 (n=6) with an average recovery rate of 100.25% (RSD=2.82%).nbsp; ConclusionThe method can be used to control the quality of Bushenyiqi granules with such advantages as simple,reliable and good reproducibility. 　　Key words：Bushenyiqi Granules；nbsp; Psoralen；nbsp; Isopsoralen；nbsp; HPLC nbsp;nbsp;nbsp; 　　补肾益气颗粒由补骨脂、黄芪、党参等组成，由汤剂改变剂型而来，具有益气、补肾、健脾的功效。本实验建立了HPLC法检测该颗粒中补骨脂素和异补骨脂素的含量测定方法。 　　1nbsp; 器材 　　补骨脂素（含量测定用，中国药品生物制品检定所，0739200108）；异补骨脂素（含量测定用，中国药品生物制品检定所；甲醇（色谱纯，上海陆都化学试剂厂）；双蒸水(自制)；HP1100高效液相色谱仪（美国惠普公司）。 　　2nbsp; 方法与结果 　　2.1nbsp; 色谱条件色谱柱为Diamonsil C18（200 mm×4.6 mm,5 μm）；流动相为甲醇水（55∶45）；流速0.85 ml#12539;min-1；检测波长245 nm。此条件下，补骨脂素和异补骨脂素可达基线分离，分离度大于1.5；理论塔板数大于2 000。色谱图见图1~2。 　　2.2nbsp; 线性关系考察分别取补骨脂素和异补骨脂素10 mg，精密称定，以甲醇溶解并定容于25 ml容量瓶中制成混合对照品溶液（补骨脂素和异补骨脂素浓度分别为0.400，0.398 mg#12539;ml-1），以此为母液配成补骨脂素和异补骨脂素浓度分别为0.008，0.016，0.032，0.048，0.064，0.080，0.007 96，0.015 92，0.031 84，0.047 76，0.063 68，0.079 6 mg#12539;ml-1。分别吸取上述对照品溶液10 μl，按上述色谱条件进行测定。以峰面积积分值为纵坐标Y，对照品含量为横坐标X（μg），绘制标准曲线，计算回归方程：补骨脂素：Y＝10 609X－19.3，r＝0.999 98，线性范围为0.08～0.8 μg，在此范围内线性关系良好；异补骨脂素：Y＝9 793.2X－21.317，r＝0.999 98，线性范围为