第12章生化(刘建华)PPT.ppt

如果荧光标记组分可以移动，淬灭分子能离开而没有淬灭的分子能观测区域，导致荧光信号增加。荧光信号恢复的速度取决于荧光标记组分侧向移动的速度，可以用扩散系数D表示。在时间t内通过的平均路程用下式表示： S = (4Dt)1/2 不同生物膜中脂质分子的扩散系数是 1 mm2 s-1左右，因此磷脂分子在1秒内扩散的平均距离是2 mm。这个数据说明在1秒钟内脂质分子能够从细菌的这端运动到另一端。扩散系数的数值表明膜的粘度是水的100倍左右，与橄榄油的黏度相当。 相反，膜蛋白的扩散速度差异很大。有些蛋白质在膜上的扩散速度与膜质脂相当，有些蛋白质在膜上基本上不可移动。例如光受体蛋白视紫质（32.3节）移动速度很快，在膜上的扩散系数是1 mm2 s-1。视紫质在膜上的快速移动保证了信号的迅速传递。另一个极端例子是纤联蛋白(fibronectin)，是与胞外介质作用的膜边缘糖蛋白，其扩散系数低于10-4 mm2 s-1。纤联蛋白在膜上移动速率极低的原因在于，该蛋白通过integrin与细胞内的肌动蛋白纤维(actin filaments)锚定。Integrin是一种跨膜蛋白，将胞外介质与胞内骨架连接起来。 液态镶嵌模型允许膜分子侧向运动但不允许跨膜转动 基于膜蛋白质能够侧向运动，1972年S. Jonathan Singer 和 Garth Nicolson提出液态镶嵌模型描述生物膜的总体结构。该模型的本质是，生物膜是定向排列的脂质和球状蛋白质的二维溶液。脂质双层有两重作用：既是镶嵌膜蛋白的溶剂，又是一种通透性障碍。除非有特定相互作用构成的限制，镶嵌膜蛋白在生物膜上的侧向扩散不受限制。 图12.30 液态镶嵌模型。 尽管膜组分在生物膜上的侧向扩散速度快，但是脂质分子从膜的一面旋转到另一面的速度非常缓慢。从一面旋转到另一面叫横向扩散(transverse diffusion下图)。 用电子旋转共振技术直接测定了磷脂酰胆碱囊泡的磷脂分子横向扩散速度，发现一个磷脂分子横向扩散一次需要数小时，比侧向扩散50 A所需时间长109倍。蛋白质横向扩散的障碍比脂质分子大得多，因为蛋白质的亲水区域比脂质分子大。实际上我们没有观测到蛋白质的横向扩散。因此能够将生物膜的不对称性维持很长时间。 膜的流动性受脂肪酸组分和胆固醇含量控制 很多膜过程，例如运输或信号传导，取决于膜的流动性。而膜的流动性又取决于脂肪酸链性质。膜脂质双层的脂肪链可以处于有序、坚硬状态，也可以处于相对无序、流动的状态。 当温度升高至熔点(Tm)以上，坚硬状态向液态转化急促。 图12.32 磷脂膜状态随温度升高发生的改变。随着温度的升高，磷脂膜结构从紧密排列的有序坚硬状态变成更为随机的状态。 转化温度取决于脂肪酸链的长度和不饱和程度（表12.3）。饱和脂肪链直，有利于脂肪链之间的相互间作用，因此处于刚性状态。而顺式双键使脂肪链扭曲，干扰了脂肪链之间的有序排列，Tm值降低（图12.33）。脂肪链的长度也影响转化温度。脂肪链愈长，相互间作用力愈大，转化温度愈高。一个-CH2-能使脂肪链之间的相互作用的自由能变化达-2 kJ mol-1。 图12.33 膜中脂肪酸链的排列。顺式双键破坏高度有序排列的脂肪链。空间填充模型显示（A）三个饱和的C18脂肪酸链的排列，和(B)其中一个含有油酸（C18的不饱和脂肪酸），将两个饱和脂肪链撑开。 在动物细胞中，胆固醇是细胞膜流动性调节的关键组分。胆固醇含有大量的甾体核，其一端带有羟基，另一端是大小不同的脂肪链。胆固醇长轴垂直插入膜脂质双层平面。胆固醇的羟基与磷脂头部的羰基氧原子形成氢键，而胆固醇的脂肪链尾巴插入膜的非极性核中。胆固醇的形状没有磷脂的脂肪链规则，因此胆固醇的插入会破坏脂肪酸链之间的相互作用。另外，胆固醇与一些磷脂似乎能形成特异的复合物。这些复合物可能集中于膜的特定区域。所形成的结构通常被称为脂质筏排（lipid raft）。这些相互作用的结果之一是调节膜的流动性，降低膜的流动性，膜发生相变的能力更差。尽管有人怀疑，但是自组装的结构如脂质筏排能聚集那些参与信号传导途径蛋白质。 所有生物膜是不对称的 膜在结构和功能上是不对称的。所以生物膜的内面和外面有不同的组分，不同的酶活性。如Na+- K+泵。 该膜蛋白泵出Na+细胞，泵入K+，ATP必须处于细胞内以驱动Na+- K+离子泵运转。Ouabain是这个泵的特异抑制剂，只能在细胞质膜外侧抑制这个泵。 膜蛋白质在膜上不对称，又不能从膜的一面横向扩散到另一面，而且生物利用现成膜进一步生长的方式合成生物膜，因此生物膜能够维持这种不对称性。但是，只有糖脂分子是绝对不对称之外，其它脂质分子在膜上的分布通常不