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第14章 蛋白质的生物合成(翻译)PPT
进位 转位 成肽 真核生物肽链合成的延长过程与原核基本相似,但有不同的反应体系和延长因子。 另外,真核细胞核糖体没有E位,转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。 (四)真核生物延长过程 原核延长因子 生物功能 对应真核延长因子 EF-Tu 促进氨基酰-tRNA进入A位,结合分解GTP EF-1-α EF-Ts 调节亚基 EF-1-βγ EF-G 有转位酶活性,促进肽酰-tRNA由A位前移到P位,促进卸载tRNA释放 EF-2 肽链合成的延长因子 三、翻译的终止 当核糖体A位出现mRNA的终止密码后,多肽链合成停止,肽链从肽酰-tRNA中释出,mRNA、核糖体大、小亚基等分离,这些过程称为肽链合成终止。 34/56 RF-3:促进RF-1或RF-2与核糖体结合,诱导 肽基转移酶变为酯酶活性,催化肽酰 基转移到水分子-OH上,使肽链从核 糖体上释放,并水解GTP。 真核生物的释放因子:eRF; eRF可识别三种密码子, 并需GTP供能。 RF-1:UAA,UAG RF-2:UAA,UGA 终止相关的蛋白质因子称为释放因子 (release factor,RF) U A G 5 3 RF COO- 原核肽链合成终止过程 39/56 多聚核糖体(polysome) — 使蛋白质合成高速、高效进行 39/56 蛋白质合成能量消耗情况 1. 氨基酸活化:2个ATP 2. 翻译起始:原核生物1个GTP 真核生物1个GTP, 1个ATP 3. 翻译延长:每形成一个肽键需2个GTP 4. 翻译终止:1个GTP ATP总消耗数:2n+2(n-1)+2(真核3) n为多肽链氨基酸残基的数目 第 三 节 翻译后加工及蛋白质输送Posttranslational Processing Protein Transportation 主要包括: 多肽链折叠为天然的三维结构 肽链一级结构的修饰 高级结构修饰 从核糖体释放出的新生多肽链不具备蛋白质生物活性,必需经过不同的翻译后复杂加工过程才转变为天然构象的功能蛋白。 一、多肽链折叠为天然功能构象的蛋白质 新生肽链的折叠在肽链合成中、合成后完成,新生肽链N端在核糖体上一出现,肽链的折叠即开始。可能随着序列的不断延伸肽链逐步折叠,产生正确的二级结构、模体、结构域到形成完整空间结构。 一般认为,多肽链自身氨基酸顺序储存着蛋白质折叠的信息,即一级结构是空间结构的基础。 细胞中大多数天然蛋白质折叠都不是自动完成,而需要其他酶、蛋白质辅助。 氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity) 。 氨基酰-tRNA的表示方法: Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet 真核生物: Met-tRNAiMet 原核生物: fMet-tRNAifMet (二)氨基酰-tRNA的表示方法 CH3 S CH2 CH2 CH H2N COO tRNAMet 转甲酰基酶 N10-CHO-FH4 CH3 S CH2 CH2 CH H-C-HN COO tRNAfMet O 20/56 大肠杆菌起始密码子编码的met须甲酰化 真核细胞起始密码子编码的met不须甲酰化 蛋白质生物合成过程 The Process of Protein Biosynthesis 第 二 节 整个翻译过程可分为 翻译过程从阅读框架的5′-AUG开始,按mRNA模板三联体密码的顺序延长肽链,多肽链的合成是从N端向C端,直至终止密码出现。 翻译的起始(initiation) 翻译的延长(elongation) 翻译的终止(termination ) 一、翻译的起始 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核糖体结合而形成翻译起始复合物 (translational initiation complex)。 参与这一过程的多种蛋白质因子,称为起始因子(initiation factor,IF)。 核糖体大小亚基分离 mRNA在小亚基上定位结合 起始氨基酰-tRNA的结合 70S起始复合物形成 (一)原核生物的翻译起始过程 IF-3 IF-1 1. 核蛋白体大小亚基分离 A U G 5 3 IF-3 IF-1 2. mRNA在小亚基定位结合 S-D序列 (Shine-Dalgarno, RBS) rps (ribosomal protein in small subunit) IF-3 IF-1 IF-2 GTP 3. 起始氨基酰t
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