第5章环境免疫分析PPT.pptx

第章 环境免疫分析1.什么是免疫2.什么是免疫分析3.免疫分析在环境分析中的应用4.环境污染物免疫分析的原理5.免疫分析用于环境分析和监测的优点6.其它基于抗体的分析方法1.什么是免疫人为什么要接种疫苗？“免疫”是什么？免疫是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能，是鸟类、哺乳类的一种十分重要的防护机制。免疫的特点：识别自身和外物；记忆；特异性。“免疫”的英文是什么？immunity, immune, immuno-人类免疫缺陷病毒(HIV)的结构抗原和抗体抗原(antigen):任何体外物质进入人或动物体内，能和抗体结合或和淋巴细胞的表面受体结合，引起人或动物的免疫反应的都称为抗原(antigen)。抗原一般是大分子物质(比如蛋白质和多糖类物质)，分子量在10,000以上，可以有效地诱导动物产生抗体。完整的抗原同时具有免疫原性和免疫反应性。免疫原性：诱导产生抗体的能力。免疫反应性：与抗体发生特异性结合的能力。有些物质只有免疫反应性而没有免疫原性，称为半抗原。抗体(antibody)是游离在血液、淋巴液等体液的一类特殊的球蛋白，称为免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)。通过免疫动物，可以得到多克隆抗体，也可以通过杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体。抗体的产生：初次免疫应答和再次免疫应答抗体的产生A.病毒（外来物质）进入机体 ；B.病毒被巨噬细胞吞噬；C.病毒被酶溶解成碎片；D.抗原呈递分子将病毒的抗原亚基传递到巨噬细胞表面 ；E.病毒抗原分子传递给T细胞 ；F. 巨噬细胞和T细胞释放的细胞因子刺激B细胞增殖；G.B细胞再次碰到病毒便产生与病毒表位特异性结合的抗体；H.抗体释放进入循环；I.抗体与病毒表位结合而中和病毒，从而抑制病毒吸附到靶细胞上。多克隆抗体制备步骤1.给动物注射一定剂量抗原，几周后诱导产生抗体；2.从动物采取含有抗体的血；3.加入抗凝剂以抗血栓形成；4.离心血样以沉淀红细胞；5.上清血浆含有抗体和其他蛋白，沉淀红细胞；6.将血清加热至65℃灭活其他蛋白，以保证抗体的纯化；7.多克隆抗体。 ??抗体的结构/sky/myxkc/images/antibody/3-2-1.swf 抗体的结构抗原与抗体作用抗体的种类多克隆抗体（polyclonal antibody，第一代抗体）：一般每个抗原都具有多个抗原决定簇(表位)，当机体受到抗原刺激后，抗原分子的许多抗原决定簇分别激活不同的淋巴细胞，形成的抗体分子在组成、结构和与抗原的亲和力等方面都有所不同，称为多克隆抗体。单克隆抗体（monoclonal antibody，第二代抗体）： 1975年K?hler和Milstein将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞在体外进行两种细胞融合，形成的部分杂交瘤细胞（hybridoma），既具有大量无限生长的特性，又具有合成和分泌抗体的能力。它们是由识别一种抗原决定簇的细胞克隆所产生的均一性抗体，称为单克隆抗体。该技术获得1984年生理学和医学诺贝尔奖。基因工程抗体（genetically engineering antibody，第三代抗体） 基因工程抗体兴起于80年代早期。这一技术是将对Ig基因结构与功能的了解与DNA重组技术相结合，根据研究者的意图在基因水平对Ig分子进行切割、拼接或修饰，甚至是人工全合后导入受体细胞表达，产生新型抗体，也称为第三代抗体。　基因工程抗体包括嵌合抗体、重构抗体、单链抗体、单区抗体及抗体库等。其中以嵌合抗体研究的较多，也较成熟。单链抗体及单区抗体虽具有结构简单、分子小等优点但其临床应用的前景尚待证实。杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体 ??制备单克隆抗体的步骤1.将某特异抗原免疫小鼠，诱导抗体的产生；2.骨髓瘤细胞培养于细胞培养皿中；3.从动物脾脏中分离抗体产生细胞；4.将抗体产生细胞与骨髓瘤细胞融合，以产生杂交瘤细胞，其具有两种细胞的性质（既产生抗体，又能无限生长）；5.选择产生正确抗体的杂交瘤细胞；6.培养杂交瘤细胞于细胞培养皿中，从上清液中收获抗体。2.什么是免疫分析“免疫分析”的英文是什么？analyze,analysis,assay,immunoassay什么是免疫分析？免疫分析(immunoassay)是利用抗原和抗体的特异性结合对微量物质进行测定的一种快速、灵敏而又相对便宜的分析方法。免疫分析在医学中广泛应用于传染病的诊断，以及各种蛋白质、酶、激素、药物和毒品等的测定。HIV/AIDS诊断标准及处理原则(GB16000-1995)附录A抗HIV抗体的检测原理和方法我国《食品卫生微生物学检验》系列标准（GB4789.1~GB4789.32）规定了部分致病细菌、真菌、毒素的免疫分析标准方法。2006年颁布了《水中微囊藻毒素的测定方法》（GB/T20466-2006）。免疫分析原理：