第十章 核酸生物合成PPT.ppt

第十章;主要内容;遗传学的中心法则;反中心法则;信息分子的复制与表达;反转录(reverse transcription)：;艾滋病—“现代瘟疫”;;一、DNA的生物合成;DNA复制的假设：;2、实验证明：;结果：;3、意义：;（二）DNA复制的起点和方向;实验证明：;1、复制起点：;3、复制叉： 细菌为环状DNA复制起始于单个位点， 双向，半保留，每 个复制泡（眼）包 括2个复制叉(DNA 的两条链在起始点分开形成)。 方向：5’→3’ ;复制叉;大肠杆菌E.Coli 大肠杆菌的复制原点叫做oriCoriC起点：;（三）原核细胞DNA的复制（DNA指导的DNA合成）;1) E.COLi DNA聚合酶Ⅰ ;DNA聚合酶Ⅰ功能：;2) DNA聚合酶Ⅱ:; DNA聚合酶Ⅰ DNA聚合酶Ⅱ DNA聚合酶Ⅲ 亚基数目 1（单体酶） ＞1（多亚基酶 ） ＞1（多亚基酶） 5’ 3’聚合活性 + 中 + 很低 + 很高 3‘ 5’外切活性 + + + （保护DNA复制的 忠实性fidelity） 5‘ 3’外切活性 + - +;E.COLi的DNA聚合酶;2、双链DNA复制的分子机制 （DNA半不连续复制）：;②实验：;③结论：;2）RNA引物;③ RNA引物酶（RNA primase); ④RNA引物（RNA primer);⑤ 过程： ;3） DNA连接酶（ligase）：;后随链生成包括：;模板DNA;与此相关的酶：;DNA旋转酶（拓扑异构酶Ⅱ,topoisomerase)：;5）DNA聚合酶的校对作用： ;总结：原核细胞DNA的复制;3、合成步骤：;DNA链延长：; 由DNA聚合酶（主要是酶Ⅰ）催化，切去RNA引物；按碱基互补原则，沿5’→3’方向，补齐缺口。;连接封口：;校正并修复DNA：;如何决定DNA复制的准确性？ ;（四）真核细胞DNA的复制： （DNA指导的DNA合成）;2、有5种DNA聚合酶， 各具功能；; 在真核细胞内有五种DNA聚合酶 （与细菌DNA聚合酶的性质基本相同：底物、模板、引物、方向） α β γ δ ε 定位 细胞核 细胞核 线粒体 细胞核 细胞核 3‘-5’ 外切 - - + + + 酶活性 功能 ;（五）反转录作用 ：（ RNA指导的DNA合成）;HIV的复制;反转录作用的生物学意义：;2）有助于对RNA病毒致癌机理的了解； 3）有助于研究疾病的起因、寻找防??途径； 4）反转录病毒可改建成理想的信息载体，用于肿瘤和遗传病的基因治疗； 5）用于分子生物学的研究：合成基因、测序。;（六）DNA的损伤与修复;2、细胞的修复机制：;2）暗修复(切除修复)：;（七）细菌的限制-修饰系统：;2、细菌碱基修饰：;意义：;二、RNA(ribonucleic acid)的生物合成;转录方式;（一）转录（DNA指导下的RNA合成）;2）模板：; 转录的不对称：;3） RNA聚合酶 （RNApolymerase, RNpol):;催化的反应：;原核细胞的RNA聚合酶;原核生物的RNApol全酶与DNA的结合;4）转录产物结构特点：;2、原核细胞的转录;1）起始：; B、起始过程：;C、形成磷酸二酯键。;2）延伸：;c、 RNpol向前移动，DNA解链酶向前推 进，RNA链延长。 ;d、方向：;3) 终止：;A、不需ρ因子的终止; 回文结构—DNA序列中以某一中心区域为对称轴，其两侧的碱基对顺序正读和反读都相同的双螺旋结构。即对称轴一侧的片段旋转180°后，与另一侧片段对称重复。 回文结构能形成十字结构和发夹结构;不需ρ因子的终止;b、需ρ因子终止;需ρ因子终止;;3、真核细胞的转录作用（自学）;多起点转录;2）转录过程：;TF与启动子结合；各种TF辨认拼接；与RNpolⅡ结合，形成起始前复合物（ PIC ）。 顺序：TATA → → → → →PIC;B、延伸；;C、终止;4、转录过程的抑制剂：; 2）口丫啶acridine:;3）利福平（利福霉素B的衍生物）：;4）α-鹅膏蕈碱：;5、转录产物的加工：;1）mRNA的加工：;多顺反子:为多条多肽链编码的mRNA. 单