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妇科常用动物实验设计和相关技术 妇科实验室 胡翔 实验方案设计(开题) 1、选择实验动物并预计数量、联系喂养和实验场所 2、分组 3、造模 4、给药 5、采血 6、处死及标本取得 选择实验动物原则 近似性原则 相容和匹配原则 重复性和均一性 饲养环境和动物选择 环境 性别判定 分组 1、按随机数字表来分组 如实验要分2个组，可作如下安排1-4入A组，5-9入B组。 查随机数字表第一行起的数字为 0 5 2 7 8 4 3 7 4 1 6 A B B A A B A A B B 分四组，1 - 2入A组；3 - 4入B组；5 - 6入C组；7 - 8入D组；9和0废弃不用。 则0 5 2 7 8 4 3 7 4 l 6 8 3 8 5 1 5 6 9 6 分组对号入座为x C A D D B B D B A C D B D C A C C x C 2、以重量分组 把未分组的动物先按笼数称重，再分几个重量段：如大鼠可以分160g-170g、170g-180g、180g-190g、190g-200g、200g-210g、210g-220g等，分段越细，则重量越平均。再将不同重量段的大鼠每组放1只，最后力求每组大鼠重量平均 。 标记 涂染红色：0.5％中性红或品红溶液 涂染黄色：3-5％苦味酸溶液 涂染咖啡色：2%硝酸银溶液 涂染黑色：煤焦油的酒精溶液 组内数量少：白，头，颈，背，尾，长；一组数量多，如小鼠，可以加涂左前、左后，右前，右后等。 造模 1、抓取固定 2、解剖 3、实验动物的动情期和受孕动物的检查方法 4、脱毛 5、麻醉 6、手术 7、抗生素 小鼠性周期阴道分泌物涂片变化 大鼠性周期阴道分泌物涂片变化 动情期 戊巴比妥钠的剂量和用法 主要麻醉药的麻醉深度判定指标 人和动物间按体表面积折算的等效剂量比值表 灌 胃 使用1-5m1注射器和金属钝针头灌胃，灌胃时将灌胃针头安在注射器上，吸入药液，左手抓住鼠背部及颈部皮肤，将动物固定，注意颈部皮肤不宜向后拉得太紧，以免勒住气管。将鼠的背部皮肤和尾巴固定在手腕大鱼际上，使小鼠头部和躯干伸直、并呈垂直体位。右手持注射器将针头由口腔而插入，避开牙齿(或由嘴角将针头插入)，沿咽后壁徐徐插入食道下段，遇有阻力时，可轻轻上下滑动，不可强行插入，一般灌胃针头插入长度小鼠为2.5-3.5cm大鼠为3.5-5.5cm。 静脉给药 一般局部环境温度要在30℃左右或以上，放小鼠在适当大小的倒扣的盆里，只露尾巴，这种容器能够压住尾部不让活动。尾部用45℃一50℃的温水浸润半分钟，待血管扩张后或小鼠出现甩尾时取出小鼠尾部，擦干消毒，在末端1／3或l／4处用左手三指捏住尾巴，右手持注射器，针头与静脉平行(小于30度)、缓慢进针，以左手拇食指将针头与鼠尾一起固定，试注入少许药液，如果注射部位皮肤不发白，并感觉进药阻力不大时，表示针头刺入静脉 。 直肠给药 一般用导尿管或灌肠用的胶皮管。在胶皮管或导尿管头部徐液体石蜡，由放手使兔蹲卧于桌上，以左臂及左腋轻轻按住兔头及前肢，以左手拉住兔尾，露出肛门，并厅有手轻握后肢，实验者将橡皮管插入家兔肛门内．深度约7-9cm，橡皮管插好后。将注射器与橡皮管套紧，即对灌注药液。 大、小鼠采血法 剪尾采血 眼眶后静脉丛采血 颈(股)动(静)脉采血,腹主动脉采血 摘眼球采血 断头采血 处死及标本取得 1、断髓法 2、断头法 3、标本固定 4、脏器称量 5、血液标本 全血 血浆 血清 血液标本的保存 1、血标本应具塞避光保存，保存容器最好用玻璃、聚氯乙烯和聚四氟乙烯制品。 2、低温下保存的样品不能住室温慢慢溶解．而应放在温水水浴中短时快速溶解。血液标本必须避免重复地冻结溶解。这样会使血液成分改变。 3、血清一般保存于4-6c冰箱或冻结保存数天。放于负70度可保存3个月左右，其多数成分较稳定的。 4、全血切勿冰冻，红细胞在冰点下受到物理作用的改变不可逆，将引起溶血和影响结果。 取血注意事项 1、注射器及试管干燥洁净 2、血液应避免流经动物皮毛 3、血液应沿管壁徐徐流入或将血注入试管内．并轻轻倒转试管与抗凝刑混合，切忌用力振摇 4、分离血清时防止过多过早剥动血块 5、一般采血后20-30分离心分离血清或血浆．如不是很快检验，将标本分离出血浆或血清置4度冰箱保存。末分离血液标本不宜在冰箱内保存时间过长。 elements * * 黄体退化 大量白细胞及少量粘膜 36－4