第7章 发酵工艺的控制1.pptVIP

复杂 涉及 生物细胞的生长、生理和繁殖等生命过程 酶催化的生化反应过程 发酵是生物、化学和工程等学科理论和技术的综合利用 是生物细胞按照生命固有的一系列遗传信息，在所处营养和培养条件下，进行复杂而细微的各种动态生化反应的集合。 第一节 发酵过程中的代谢变化及主要控制参数 第二节 菌体浓度的影响及其控制 第三节 基质的影响及其控制 第四节 温度的影响及其控制 第五节 pH的影响及其控制 第六节 溶氧的影响及其控制 第七节 CO2的影响及其控制 第八节 补料的作用和控制 第九节 泡沫的影响及其控制 第十节 发酵终点的判断 第一节 发酵过程中的代谢变化及主要控制参数 代谢变化：就是反映发酵过程中菌体的生长，发酵参数（培养基，培养条件等）和产物形成速率三者间的关系。 代谢变化曲线：把菌体生长、发酵参数和产物形成速率随时间变化的过程绘制成图，就成为所说的代谢曲线。 ■发酵过程按进行过程有三种方式： 分批发酵(Batch fermentation) 补料分批发酵(Fed-batch fermentation) 连续发酵(Continuous fermentation) 分批发酵 1、分批发酵的定义 是指在一封闭系统内含有初始限量基质的发酵方式。在这一过程中，除了氧气、消泡剂及控制pH的酸或碱外，不再加入任何其它物质。发酵过程中培养基成分减少，微生物得到繁殖。 2.分批发酵的特点 微生物所处的环境在发酵过程中不断变化，其物理，化学和生物参数都随时间而变化，是一个不稳定的过程。 优点 操作简单； 操作引起染菌的概率低。 不会产生菌种老化和变异等问题 缺点 非生产时间较长、设备利用率低。 补料分批发酵 1、定义 补料分批发酵又称半连续发酵或流加分批发酵，是指在分批发酵过程中，间歇或连续地补加新鲜培养基的发酵方式。 2、补料分批发酵的优缺点 优点 使发酵系统中维持很低的基质浓度； 和连续发酵比、不需要严格的无菌条件； 不会产生菌种老化和变异等问题。 缺点 存在一定的非生产时间； 和分批发酵比，中途要流加新鲜培养基，增加了染菌的危险。 3、补料分批发酵的类型 补料方式 连续流加 不连续流加 多周期流加 补料成分 单一组分流加 多组分流加 控制方式 反馈控制 无反馈控制 连续发酵 1、定义 培养基料液连续输入发酵罐，并同时放出含有产品的相同体积发酵液，使发酵罐内料液量维持恒定，微生物在近似恒定状态（恒定的基质浓度、恒定的产物浓度、恒定的pH、恒定菌体浓度、恒定的比生长速率）下生长的发酵方式。 2、连续发酵的优缺点 优点 能维持低基质浓度； 可以提高设备利用率和单位时间的产量； 便于自动控制。 缺点 菌种发生变异的可能性较大； 要求严格的无菌条件。 3、连续发酵的类型 恒化培养 使培养基中限制性基质的浓度保持恒定 恒浊培养 使培养基中菌体的浓度保持恒定 工业上为了防止出现菌种衰退和杂菌污染等实际问题，大都采用分批发酵或补料分批发酵这两种方式。 一、分批发酵的代谢类型 二、发酵过程的代谢变化规律 （一）初级代谢产物的代谢变化 （二）次级代谢产物的代谢变化 三、发酵过程的主要控制参数 按照菌体生长，碳源利用和产物生成的变化 第一类型 生长关联型 第二类型 部分生长关联型 第三类型 非生长关联型 分批发酵的分类对实践的指导意义 二、发酵过程的代谢变化 （一）初级代谢的代谢变化 生长过程仍显示停滞期（1、2）、对数期（3、4）、稳定期（5）和衰亡期（6）等生长史的特征 工业发酵中往往要接入处于对数期(特别是中期)的菌体，以尽量缩短停滞期。 （二）次级代谢的代谢变化 次级代谢产物的发酵属于菌体的生长与产物非偶联的类型，菌体生长繁殖阶段(又称生长期)与产物生成阶段(又称生产期)是分开的。 ⒈ 菌体生长阶段 接种后，菌体开始生长，直达到菌体的临界浓度。这个阶段一般又称为菌体生长期或发酵前期，也有人称为平衡期 菌体DNA含量达到定值，即不进行繁殖，细胞数量恒定，但多元醇、脂类等细胞内含物仍在积累，使菌体干重增加，此时开始合成产物，此刻的菌体浓度称为临界浓度。 基质被消耗，浓度下降 菌浓升高 摄氧率升高，DO下降 ⒉ 产物生成阶段 产物数量逐渐增多，直至达到高峰，生产速率也达到最大，直至产物合成能力衰减。这阶段一般称为产物生产期或发酵中期。 基质不断被消耗 产物增多 对外界环境敏感，要严格控制 基质过多，不合成产物 基质过少，菌体衰老，产量下降 ⒊ 菌体自溶阶段 这个阶段一般称为菌体自溶期或发酵后期。 菌体衰老，细胞开始自溶 DO上升 产物合成能力下降 此阶段发酵必须结束，否则 产物易受破坏 后期分离困难 根据发酵过程中的参数变化绘制出的次级代谢的代谢曲线，可清楚地说明过程中的代谢变化，并反映出碳源、氮源的利用和pH值、菌体浓度和产物浓度等参数之间的相互关系。 分