电泳应用--SEBIA.pptVIP

电泳技术在临床检验中的应用 背景简介 电泳：在直流电场中，带电粒子向带符号相反的电极移动的现象（electrophoresis） 发展历程 1809年俄国科学家列伊斯首先发现电泳现象 1937年瑞典科学家Tiselius建立了界面电泳技术 ，并首次证明了血清是由白蛋白及α、β、γ球蛋白组成的因此获得1948年诺贝尔化学奖 1950年后，区带电泳从发展到成熟 1980年以来，毛细管电泳逐渐受到重视 醋酸纤维素薄膜电泳 凝胶电泳 琼脂糖凝胶电泳 : 琼脂糖凝胶适用于蛋白质和核酸的电泳支持介质. 聚丙烯酰胺凝胶电泳 : 最常用的定性分析蛋白质的电泳方法，特别是用于蛋白质纯度检测和测定蛋白质分子量. 毛细管电泳 :经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物 毛细管电泳(Capillary Electrophoresis) CE是经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物 “CE”统指以高压电场为驱动力, 以毛细管为分离通道, 依据样品中各组分之间电泳速度及分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。 毛细管电泳 毛细管电泳所用的石英毛细管柱，在pH3的情况下，其内表面带负电，和缓冲液接触时形成双电层，在高压电场的作用下，形成双电层，一侧的缓冲液由于带正电荷而向负极方向移动形成电渗流。同时，在缓冲液中，带电粒子在电场的作用下，以不同的速度向其所带电荷极性相反方向移动，形成电泳，电泳流速度即电泳淌度。带电粒子在毛细管缓冲液中的迁移速度等于电泳淌度和电渗流的矢量和。各种粒子由于所带电荷多少、质量、体积以及形状不同等因素引起迁移速度不同而实现分离。 影响电泳分离的主要因素 加样梳 电泳技术的医学应用 蛋白质电泳分析是实验室必备的检测手段，可全面、精确描绘出患者蛋白质的全貌。对疾病的早期诊断，疗效观察及预后判断具有非常重要的临床价值。 蛋白的电泳检测 根据使用的染料或者是底物的不同，我们可以检测到不同类型的蛋白: 血清蛋白 脂蛋白 (运送脂类) 各种酶类 血红蛋白 正确解释电泳结果有助于临床疾病判断的参考 血清蛋白电泳 血清蛋白电泳的目的是什么？ 检测异常 : 含量的变化 : 条带中蛋白含量的增加或减少 性质的变化 : 异常条带的出现 临床意义 将电泳作为常规检测之一，有助于我们对以下疾病的筛查 : 炎症 营养不良 肺气肿 临床意义 对异常条带的筛查,有助于我们检测下列疾病: 骨髓瘤 Waldenstrom巨球蛋白血症 细菌和病毒感染 在这些情况下, 必须要做其他辅助测试, 比如说免疫固定, 使用不同类型的抗血清对异常蛋白进行检测. (对于后期治疗有很重要的指导意义) 什么情况下必须进行电泳检测？ 血液沉降速度发生异常变化 出现恶性疾病征兆 在免疫球蛋白定量检测中发现 某一种免疫球蛋白出现大量异常增加 双白蛋白,或者一条宽峰,或者在白蛋白条带出现附属条带可能是由以下原因造成 : - 遗传性双白蛋白血症 - 暂时性的双白蛋白血症可能是由于药物刺 激导致的 - 急性胰腺炎导致的双白蛋白血症 : 大量的 胰酶的出现可以导致白蛋白降解 在下列情况下白蛋白会出现下降 : - 肾病综合症, 蛋白流失, 胃肠病: 检查尿蛋白 - 淋巴细胞增生综合征 - 营养不良 - 肝脏功能不全 - 慢性炎症 - 严重烧伤 - 血液稀释 在下列情况中白蛋白会出现增加: - 脱水症状 - 血液浓缩 - 白蛋白注射 Alpha 1 globulins 将会在下列情况下出现下降: - 蛋白流失 - 肝功能不全 - 先天性抗胰蛋白酶缺乏症 出现两个条带: - 抗胰蛋白酶的不同基因型 出现增加: - 炎症症状 Alpha 1-酸性糖蛋白 : AAG是主要的急性时相反应蛋白，在急性炎症时增高，显然与免疫防御功能有关明。 AAG的测定目前主要作为急性时相反应的指标，在风湿病、恶性肿瘤及心肌梗死患者亦常增高，在营养不良、严重肝损害等情况下降低。 Alpha 2 globulins 下列情况中出现下降: - 肝功能不全 - 血管内溶血 出现两个条带: - 溶血的标本 (haptoglobin-hemoglobin complex) - 出现特殊表型的结合珠蛋白 - 出现迁移率靠近正极端的单克隆免疫球蛋白 出现两个