（课件）上海交通大学医学院附属仁济医院血管外科张岚.pptVIP

上海交通大学医学院附属仁济医院 血管外科 张 岚; 静脉血栓栓塞症(VTE)发病率高、危害严重 病因：遗传性、获得性 （FV Leiden突变；AT、PC和PS抗凝蛋白缺陷） ;AT属于丝氨酸蛋白酶抑制物超家族中的一员，是人体抗凝系统中最重要的一种抗凝物质，约占抗凝系统总活性的70% 432个氨基酸组成，相对分子量为58KDa 反应位点区与肝素结合区 分型 I型主要表现为AT抗原（AT:Ag）和活性（AT:A）的同步减少， II型是由于AT结构异常所致。分为RS型（反应位点突变型）、HBS（肝素结合位点变异）和PE（多重变异）等3个亚型; AT基因测序 同源模建 突变质粒构建 蛋白免疫印迹 ELISA 激光共聚焦显影 ;;c.134GA 箭头所示:突变碱基;; 自然界中蛋白质结构骨架的多样性远少于蛋白质序列的多样性 蛋白质三维结构预测中最为可靠和实用的方法 AT13位碱基与82位碱基在10类物种高度保守 通过同源模建，可以将该区碱基进行任意的人为替换，通过软件分析系统计算出一系列静电力的变化情况，为进一步AT构象病的蛋白质功能研究提供理论基础 ;;;;;AT：Ser82Arg与周围原子基团产生碰撞； 分子间静电力作用半径重叠；分子间距离缩短;1：空白对照 2：AT-wt 3：AT-82 4：AT-13 5：AT-double WB显示：AT-82与AT-double细胞裂解中AT:Ag显著上升;用3种不同质粒转染HEK293T分别检测细胞上清液与细胞裂解液中的AT:Ag含量;左图：双突变质粒转染细胞；右图：野生型质粒转染细胞;AT Morioka（C95R） Cys21-Cys95间二硫键消失 Ser82Asn 额外糖基化 Phe299Leu 合成了一种不耐热的杂合性AT蛋白而导致AT缺陷 13387-9delG、T98I和A404T突变 AT蛋白分泌障碍和细胞内快速降解 Leu99Phe AT蛋白分泌障碍和细胞内滞留; AT-c.134GA c.342TG突变体AT在细胞内潴留 AT-c.342TG突变起主导作用;;bKaKjpL(zpy2wVMJ0-O*MqP7*WEMH1ZDS!$R0(rdTYh%Lj+je47bG9w(nzJd7VQ8(AQCT!)$qiRib*(i3MGHyR$YmPlLWrZ3zpaahw(U*FV661nTnZDqQPis$Kq#R6juCyhClP72%QqNZtyaQlO7jtn8ZLVAv24RKAsgU!4qCTfbguIdyDDgD9zeHaD)x7JKgngLZwrDWQpIglP59pnSKmGcIGSqoVDUFq7#s8P!LVKcB2y%3pTnkLV*T2LX)45wFR4lvtc2YBlHY0F7Bf4yQ80Mf8jypv+SKWcazBb55oiH1e0T(X0-O!Rw6ixdM#$BnFW#(5(cc4iVsc%tC6%y+7+Kw0YlTv+$h%ElG-r+4Ege15oov6+c3X!5CopHxrzb6nS7*(Yy1RV9zFJ8Wqhes-prGFk4TP1Y8zFv!QiETDWl1PpU0YNW#UFiklZ5gPjUmhD(Km85GhOD%qx%ZiZa7$bssD5oD#YS5+dE4xzXERlQQYbq#C-$Qxqbo$-XAWeIAI)K33brfmgGK#4YH+xzP0Ha1*L$AmiKuBjFUZBr(86ZmE$blZxa1OHpXDFrQpPD(dulTmS8hr7gVYIFPxJ4l+!aoraKwDyPSqp2tibs+!0wFlNYOz0Kxot2H)G*d9+8N4hlZh!2hme8LbXDg8TpMoRrYt9Z1d+M43%x5fSMwB6HF1BzPOI%emWMsXy-I*kvifjaTV#VreHk-Ggrch+AQQ37Qg0XT4sbgnf9+)ZozF-YkJfOLb2s6ihuHJC-gpD3%6BZxbmzEj7(gQmi800SX3HcteTIMUYts-hBN18LdD0KJpUItjCnzTd5lXq6ciUj6Djz24Kq1)dTiXDxZXydH2N4H$%YWFN-hC*)820pfNVoxeq!vS0FMP(85LS63F8!Rovmxlxh7pyk0QQNv1ePvoqFy1xi+yO8uqn(bUR+N%KQvphnpTIb68QIFZl3FCVbw%2GcAeT389kA+pUXFYdEoEeBje*GdiRi)92Tdk3Q!0FlX2ddCC1z3f58e+3IDuaMOc6prsmq2YY(DV+EQ#MjKs1)p#TlqDnzmWhyW2X!vd+po1L7hO#6qtNo