食品仪器分析教学知识（大学期末复习资料）.docVIP

食品仪器分析 1、 色谱分析法导论 色谱法分类、特点； 分类： (1)气相色谱：流动相为气体（称为载气）。按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱；按色谱柱可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱； (2)液相色谱：流动相为液体（称为淋洗液）。按固定相的不同分为：液固色谱和液液色谱。 （3）其他色谱方法 薄层色谱和纸色谱：用于初步定性的色谱方法 凝胶色谱法：测聚合物分子量分布 超临界色谱: CO2流动相 高效毛细管电泳:九十年代快速发展、特别适合生物试样分析分离的高效分析仪器 特点： （1）分离效率高：复杂混合物，有机同系物、异构体、手性异构体。 （2）灵敏度高：可以检测出μg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量。 （3）分析速度快：一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。 （4）应用范围广： 气相色谱：沸点低于400℃、结构稳定的各种有机或无机试样的分析。 液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。 色谱曲线图及有关术语； （一）组分分离 当流动相中样品混合物经过 （二）色谱流出曲线和色谱峰 由检测器输出的信号强度对时间作图，所得曲线称为色谱流出曲线。曲线上突起部分就是色谱峰。 色谱流出曲线和色谱峰 基线：在实验操作条件下，色谱柱后没有样品组分流出时的流出曲线称为基线，稳定的基线应该是一条水平直线。 峰高：色谱峰顶点与基线之间的垂直距离，以（h）表示。 （三）保留值 1.死时间tM 不被固定相吸附或溶解的物质进入色谱柱时，从进样到出现峰极大值所需的时间称为死时间，它正比于色谱柱的空隙体积，如下图。 2. 保留时间tR 试样从进样到柱后出现峰极大点时所经过的时间，称为保留时间，如下图。 组分在色谱柱中的保留时间tR包含组分通过柱子的时间和组分在固定相中滞留的时间，所以tR实际上是组分在固定相中保留的总时间。 3.调整保留时间tR′ 某组分的保留时间扣除死时间后，称为该组分的调整保留时间，即 tR′= tR ( tM 4．分离度 分离度是描述难分离物质对的实际分离程度。即柱效为多大时，相邻两组份能够被完全分离。 难分离物质对的分离度大小受色谱过程中两种因素的综合影响：保留值之差──色谱过程的热力学因素； 区域宽度──色谱过程的动力学因素。 塔板理论； 塔板理论的假设： (1) 在每一个平衡过程间隔内，平衡可以迅速达到； (2) 将载气看作成脉动（间歇）过程； (3) 试样沿色谱柱方向的扩散可忽略； (4) 每次分配的分配系数相同。 当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。 理论塔板数 n 定义为: 有效塔板数和有效塔板高度 单位柱长的塔板数越多，表明柱效越高。 用不同物质计算可得到不同的理论塔板数。 组分在tM时间内不参与柱内分配。需引入有效塔板数和有效塔板高度： 速率理论； 1. 速率方程 H = A + B/u + C·u H：理论塔板高度， u：载气的线速度(cm/s) 减小A、B、C三项可提高柱效；存在着最佳流速； A─ A = 2λdp dp：固定相的平均颗粒直径 λ：固定相的填充不均匀因子 固定相颗粒越小dp↓，填充的越均匀，A↓，H↓，柱效n↑。表现在涡流扩散所引起的色谱峰变宽现象减轻，色谱峰较窄。 B/u —分子扩散项 B = 2 νDg ν：弯曲因子，填充柱色谱，ν1。 Dg：试样组分分子在气相中的扩散系数（cm2·s-1） (1) 存在着浓度差，产生纵向扩散; (2) 扩散导致色谱峰变宽，H↑(n↓)，分离变差; (3) 分子扩散项与流速有关，流速↓，滞留时间↑，扩散↑; (4) 扩散系数：Dg ∝(M载气)-1/2 ； M载气↑，B值↓。 C ·u —传质阻力项 传质阻力包括气相传质阻力Cg和液相传质阻力CL即：C =（Cg + CL） k为容量因子； Dg 、DL为扩散系数。 减小担体粒度，选择小分子量的气体作载气，可降低传质阻力。 分离度； 分离度是描述难分离物质对的实际分离程度。即柱效为多大时，相邻两组份能够被完全分离。 难分离物质对的分离度大小受色谱过程中两种因素的综合影响：保留值之差──色谱过程的热力学因素； 区域宽度──色谱过程的动力学因素。 定性和定量方法。 1 定性分析 在色谱条件一定时，任何一种物质都有确定的保留时间。 通过比较已知物和未知物的保留参数或在固定相上的位置，即可确定未知