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心肌细胞肥大中番茄红素对自噬作用 　　[摘要] 目的 探讨在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌肥大中，番茄红素对自噬的影响。 方法 原代培养的乳鼠心肌细胞，采用AngⅡ干预建立心肌肥大的模型；用番茄红素和自噬的阻断剂3-甲基腺嘌呤（3MA）干预。在光学显微镜下观察心肌细胞的形态；采用Western blot法检测自噬相关基因6（Atg6）Beclin1及自噬相关基因8（Atg8）LC3蛋白的表达；Real time PCR技术检测心肌细胞肥大标志物心房利钠多肽（ANP）的mRNA表达。 结果 在AngⅡ诱导的心肌肥大中[细胞面积（517.19±52.31）；ANP相对含量（17.83±2.07）]，番茄红素[细胞面积（355.82±40.45）；ANP相对含量（12.16±1.41）]缓解了心肌细胞面积的增加（F = 56.518，P 　　[关键词] 心肌细胞；心肌肥大；番茄红素；血管紧张素Ⅱ；自噬相关基因 　　[中图分类号] R542.22 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）11（c）-0011-04 　　The effect of lycopene on autophagy in cardiac hypertrophy induced by angiotensin Ⅱ 　　WANG Haining LI Jilin YAO Huaiqi YANG Baojun XU Tan 　　The First Affiliated Hospital of Shantou University， Guangdong Province， Shantou 515041， China 　　[Abstract] Objective To investigate the effect of lycopene on autophagy in cardiac hypertrophy induced by angiotensin Ⅱ （AngⅡ）. Methods Cardiac hypertrophy was induced by AngⅡ incultured neonatal rat cardiomyocytes. Morphology and expression of hypertrophy marker atrial natriuretic peptide （ANP） were detected by optical microscope and Real time PCR. Protein level of Atg6 （Beclin1） and autophagic marker， LC3 were tested by western blotting. Results Lycopene down regulated cell surface area [（355.82±40.45） vs （517.19±52.31）， F = 56.518， P 　　1 材料 　　1.1 动物 　　SD乳鼠，清洁级，1～2日龄，汕头大学医学院实验动物中心提供（SCXK粤2012-0017）。 　　1.2 主要试剂 　　DMEM-F12培养基（SH30023.01B）和胎牛血清（SV30087.01）（Hyclone）；胰蛋白酶和Ⅰ型胶原酶（B1067）（Gibco）；5-溴脱氧尿嘧啶核苷BrdU（B5002），血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）（A9525）和3-甲基腺嘌呤3MA（M9281）（Sigma）；Lyclycopene（L9879-10MG）（Sigma-Aldrich）；微管相关蛋白1轻链3 LC3 Ⅰ/Ⅱ抗体（3868s），Bclin1抗体（3738s）和甘油醛-3-磷酸脱氢酶GADPH（2118s）（Cell Signaling Technology）；羊抗兔IgG-HRP（SA00001-2）（PTG，proteintech group），免疫印迹发光液（WBKLS0100）（Millipore），四氢呋喃（THF）（tetrahydrofuran）和2，6-二叔丁基对甲酚（BHT）（butylated hydroxytoluene）（上海宝曼生物科技有限公司）；无核酶水（9012），逆转录酶（DR100A），RNA酶抑制剂+脱氧核糖核苷酸混合物（RR02MA）（Takara）。 　　2 方法 　　2.1 原代心肌细胞分离和培养 　　消毒乳鼠，开胸取心脏，用D-Hanks溶液去血污，分离心室。置入离心管，剪碎1 mm3大小，加入0.125%的胰酶37℃消化10 min，弃上清，放入0.05%Ⅰ型胶原酶，37℃振荡消化2 h。用上述胰酶重复消化1～2次，每次约6