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牛奶中微生物的鉴定
牛奶中微生物的鉴定
摘 要: 【目的】采用两种种细菌学检查方法对牛乳中细菌进行卫生检查, 比较得出最佳检测方法。【方法】 采用美蓝还原酶实验法、标准平板计数法进行测定, 确定不同来源的生牛乳的等级、巴氏 消毒牛乳的卫生标准。【结果】美蓝还原酶实验法 是用于测定牛乳质量的一种定性检测法, 操作简便, 不需特 别设备.它不能做为定量检查; 平板菌落计数法速度慢,需要平板上长出菌落一段时后才能计数。【结论】 由于平板菌落计数法通常间做梯度稀释,所以计数的线性范围大.由于是菌悬液涂布,所以比较均匀,能较 好的反应菌落的疏密程度.重复性,平行性很好,是经典的计数方法。
关键词:生牛乳;细菌
Inspection of Bacteria in the Milk
Abstract: [OBJECTIVE]Knows the bacteriological inspection method in milk and the sanitary quality of the judgment standard , learns to use the pap disinfection method. [METHOD]Uses the methylene blue reductase method,the standard plating count method to carry on the determination.[RESULTS] bacteria;The Methylene blue reductases method is used in determining the COWS milk quality.It can not use for the qualitative examination; The plating colony count methods is relatively slow,needs the growth of bacteria on the plate and colonies can be counted.[CONCLUSION] The plating count method is milk flat bacterial count of the conventional method, this method is sensitive , milk contains a small amount of bacteria, can be calculated the right result.
Key word: The cow s milk, Bacterium, Inspection
1 材料与方法
1.1试验材料: 亚奥特纯牛乳 一袋,亚奥特鲜牛乳 一袋(已开袋),牛肉膏蛋白胨琼脂;
溶液或试剂:美蓝溶液(1:250000) ;无菌水等;
仪器或其它用具: 灭菌培养板(9-12个)、移液枪(一支1ml 一支5ml)、枪头,试管(18*180),棉塞,试管架,水浴锅,电子天平,称量纸,玻璃棒,标记笔,橡皮筋,报纸,酒精灯,火柴,三角瓶(250ml),药匙等。
1.2 试验方法
1.2.1美蓝还原酶实验法
(1)标记3 个无菌试管 1 , 2和3。
(2)分别向 3 个试管加入 10ml质 差牛乳样品,生鲜牛乳样品和生鲜牛乳样品。
(3)分别向1和2各加入 1ml 美蓝溶液,塞紧管塞。
(4)轻轻倒转试管 4 次,置 37℃水浴锅中,并记录 培养时间。
(5)试管在水浴中稳定 5min 后取出,轻轻倒转一 次后在放回水浴中。
(6)每隔 30min 记录试管中美蓝颜色的变化,直至3~6h。
1.2.2 巴氏消毒牛奶
巴氏消毒在实际应用中,其温度范围较广,一般在63-90℃之间视消毒时间而定,本实验采用80℃ 15min。
(1)将水浴锅的温度调到 80℃。
(2)将生牛乳样品用力摇匀,使微生物能均匀分 布。
(3)用 10ml 无菌移液管吸 5ml 放入灭菌试管内,然后将试管放入调好温度的水浴锅中(水面要超过牛乳的表面)。
(4)将试管放水浴内保持 15min,并不时摇动。
(5)一到15min,立即取出试管,用流动的自来水冲试管外壁,使其中的牛乳迅速冷却。
1.2.3 标准平板记数法
(1)将巴氏消毒的牛奶样充分摇匀 ,吸取 1ml 牛 奶用蒸馏水稀释,稀释度依次为 10-2、10-3、10-4。
(2) 用 1ml 无菌移液管从最大稀释度开始各取1ml 注入已标明样品和稀释度的空白平板内。
(3) 各平板倾注约 15ml 已融化并冷却至 45℃左 右的肉膏蛋白胨琼脂,立即放桌上摇匀。
(4)凝固后倒置于 37℃
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