植物生理学实验五叶绿素a 、b 含量的测定（光光度法）.pptVIP

韩山师范学院生物系 植物生理学实验 实验五 叶绿素a 、b 含量的测定（分光光度法） 实验原理 叶绿素a、b在长波方面最大吸收峰分别位于663 nm和645 nm。 同时在该波长时，叶绿素a、b的比吸收系数K为已知，我们即可以根据Lambert－Beer定律，列出浓度C与光密度D之间的关系式： Ca=12.7 OD663-2.69 OD645 …………………………………（1） Cb=22.9 OD645-4.68 OD663 …………………………………（2） CT= Ca + Cb=8.02 OD663+20.21 OD645 ……………………（3） (1)、(2) 中的OD663、OD645为叶绿素在波长663 nm和645 nm时的光密度。 Ca、Cb 为叶绿素a、b的浓度， Ct 为总叶绿素浓度，单位为mg/L。 实验目的 熟悉在未分离的叶绿体色素溶液中测定叶绿素a和b的方法及其计算。 植物材料: 自选 实验器材：分光光度计、台天平、剪刀、研钵、漏斗、移液管、量筒、10 mL容量瓶。 实验试剂：80% 丙酮、 碳酸钙、 石英砂、 水、 丙酮。 实验器材和试剂 提取叶绿素 称取0.4 g鲜菠菜叶，剪碎置于研钵中，加蒸馏水5-6 mL，少许碳酸钙和石英砂，仔细研磨成匀浆，用蒸馏水定容到10 mL。然后用移液管吸取2.5 mL，置于一大试管中，加入丙酮7.5 mL，摇动试管，促使叶绿素溶于丙酮中，静置片刻使残渣沉于管底，将上面绿色上清夜过滤在另一干净的试管中，此即为叶绿素丙酮溶液，做测定用。 测量光密度 取直径为1 cm的比色杯，注入上述叶绿素丙酮溶液，另以80％丙酮注入同样的比色杯中，作为空白对照，与663 nm和645 nm波长下读取光密度。 将测定得的光密度值代入公式（1）（2）（3）计算出Ca、Cb及总Ct的质量浓度 实验方法和步骤 仔细观察和记录实验结果。 计算出Ca、Cb及总Ct的质量浓度。 计算今天菠菜中Ca、Cb及总Ct的含量。 叶绿素a的含量（mg/g鲜重）= 叶绿素b含量（mg/g鲜重）= 叶绿素c含量（mg/g鲜重）= 结果分析 韩山师范学院生物系 植物生理学实验 实验六 植物光合强度的测定（改良半叶法） 实验原理 改良半叶法是将植物对称叶片的一部分遮光或取下置于暗处，另一部分则留在光下进行光合作用，过一定时间后，在这两部分叶片的对应部位取同等面积，分别烘干称重。因为对称叶片的两对应部位的等面积的干重，开始时被视为相等，照光后叶片重量超过暗中的叶重，超过部分即为光合作用产物的量，并通过一定的计算可得到光合作用强度。 植物材料: 生长的榕树叶 实验器材：分析天平、烘箱、剪刀（自备）、称量瓶、打孔器、纱布、棉签。 实验试剂：三氯乙酸（5 %） 。 实验器材和试剂 实验步骤 选择测定样品：选择生长旺盛常绿向阳的榕树叶片20片。用小纸牌编号。 叶子基部处理：采用5%三氯乙酸涂在叶柄，以阻断光合产物的输出。 剪取样品：按编号次序分别剪下对称叶片的一半（主脉不剪下）。按编号顺序夹于湿润的纱布中，贮于暗处，过六个小时左右，在依次剪下另外半叶，按同样的编号夹于湿润的纱布中（两次剪叶的速度应尽量保持一致。） 实验步骤 称重比较：将叶片对应部位重叠在一起，用打孔器均匀打相同数目的孔（50），分别置于光照及黑暗的两个称量皿中，80-90℃下烘干至恒重，在分析天平上称重比较。 计算结果 叶片干重之差除以叶面积及照光时数，即得光合作用强度。 结果分析 干重增加数（mg） 光合作用强度 = ———————————— 切取叶面总和（dm2）×照光时数（h） * * 渗透作用是指水分子(或其他溶剂分子)通过半透膜从低浓度溶液向高浓度溶液的扩散。 发生渗透作用的条件：有半透膜 膜两侧有浓度差 . * 渗透作用是指水分子(或其他溶剂分子)通过半透膜从低浓度溶液向高浓度溶液的扩散。 发生渗透作用的条件：有半透膜 膜两侧有浓度差 . * * 渗透作用是指水分子(或其他溶剂分子)通过半透膜从低浓度溶液向高浓度溶液的扩散。 发生渗透作用的条件：有半透膜 膜两侧有浓度差 . * * 渗透作用是指水分子(或其他溶剂分子)通过半透膜从低浓度溶液向高浓度溶液的扩散。 发生渗透作用的条件：有半透膜 膜两侧有浓度差 . * * 渗透作用是指水分子(或其他溶剂分子)通过半透膜从低浓度溶液向高浓度溶液的扩散。 发生渗透作用的条件：有半透膜 膜两侧有浓度差 . * * 渗透作用是指水分子(