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直击高考优化方案2016届高三生物一轮复习课件第十一单元 生物技术实践 第38讲 微生物的培养与应用原创首发
解析:(1)取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间,可依据是否产生菌落确定培养基的灭菌效果是否理想。由样品中菌株数计算公式:(C÷V)×M知:1 mL水样中菌株数为(38÷0.1)×100=3.8×104,故每升水样中的活菌数为3.8×107。(2)利用接种环接种时,接种环需灼烧 灭菌。利用平板划线法分离细菌时,在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始,可以将聚集的菌体逐步稀释以便得到单个菌落。(3)稀释涂布平板法是用涂布器将菌液均匀涂布在培养基表面,故培养后产生的菌落应随机分布在培养基 表面,即B表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)液体培养基通过振荡可提高溶氧量,同时使菌体与营养物质充分接触,提高营养物质的利用率,从而提高细菌的生长速度。 1.筛选菌株 (1)原则:人为提供有利于_______________生长的条件,同时抑制或阻止其他微生物的生长。 考点三 微生物的筛选与计数 目的菌株 (2)菌株筛选原理的比较 土壤中分解 尿素的细菌 分解纤维素的微生物 选择培养基的成分 ______作为唯一的氮源 _________作为唯一的碳源 鉴定 方法 在培养基中加入_________指示剂,若指示剂变红,pH升高,说明细菌能分解尿素 刚果红染色法,即刚果红与纤维素形成_______________,当纤维素被分解后,培养基出现以___________________________ 尿素 纤维素 酚红 红色复合物 纤维素分解菌为中心的透明圈 2.几种典型微生物的筛选方法 (1)培养基中加入__________可以分离出酵母菌和霉菌。 (2)培养基中加入_______________可得到金黄色葡萄球菌。 (3)培养基中缺乏___________时,可以分离固氮微生物。 (4)当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果。如当石油是唯一碳源时,可以抑制不能利用石油的微生物的生长,使能够利用石油的微生物生存,达到分离能消除石油污染的微生物的目的。 (5)改变微生物的____________,也可以达到分离微生物的目的,如将培养基放在高温环境中培养,只能得到耐高温的微生物。 青霉素 高浓度的食盐 氮源 培养条件 3.统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法 ①原理:利用特定_______________________________,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。 ②方法:用计数板计数。 ③缺点:不能区分死菌与活菌。 细菌计数板或血细胞计数板 (2)间接计数法(活菌计数法) ①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的_______________,就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②计算公式:每克样品中的菌株数=(C÷V)×M,其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。 ③操作:设置_______________,增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。 菌落数 重复组 深度思考 1.为了使结果接近真实值,应如何设置平板,计算出菌落平均数? ___________________________ 2.某同学在测定大肠杆菌的密度时发现培养基上还有其他杂菌的菌落,由此他判断该品系大肠杆菌被污染了。他的判断是否确切?为什么? ___________________________ 3.计算时若本组实验值与其他平板计数值相比,明显偏离实际值,应如何处理? ___________________________ 提示:1.设置三个或三个以上的平板。 2.不确切。因为不能确定杂菌是来自培养基还是来自培养过程。 3.要舍弃掉后求平均值。 3.下面是探究如何从土壤中分离出自生固氮菌与计数的实 验。完成下列问题: (1)实验原理:农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较 多。将用表层土壤制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行 培养。在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这 种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离。 (2)材料用具:农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨 培养基、盛有9 mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛有90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。 (3)方法步骤: ①倒平板:分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平 板,应在____________________操作。 ②制备土壤稀释液:取土样10 g加入盛有 90 mL 无菌水的锥 形瓶中,充分摇匀。用无菌吸管吸取上清液1 mL,转至盛有9 mL的无菌水的试管中,依次稀释到107稀释度。 ③涂布:按照由107~103 稀释度的顺序分别吸
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