发酵工程 三、微生物的群体生长.pptVIP

* 3、The most probable number method（液体稀释法） 主要适用于只能进行液体培养的微生 物，或采用液体鉴别培养基进行直接 鉴定并计数的微生物。 对未知样品进行十倍稀释，然后根据估算取三个连续的稀释度平行接种多支试管，对这些平行试管的微生物生长情况进行统计，长菌的为阳性，未长菌的为阴性，然后根据数学统计计算出样品中的微生物数目。 4、显微镜直接计数法 1）常规方法： 采用细菌计数板或血球计数板，在显微镜下对微生物数量进行直接计数（计算一定容积里样品中微生物的数量）。 缺点： 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察； 4、显微镜直接计数法 2）其它方法： 将已知颗粒浓度的样品（例如血液）与待测细胞细胞浓度的样品混匀 后在显微镜下根据二者之间的比例直接推算待测微生物细胞浓度。 比例计数： 过滤计数： 当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品 通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色，并经处理使膜透明，再在显 微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数； 活菌计数： 采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数 （二）以生物量为指标测定微生物的生长 1、比浊法 在一定波长（一般450-650nm）下，测定菌悬液的光密度，以光密度(optical density, 即O.D.) 表示菌量。 实验测量时应控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内，否则不准确。 2、重量法 以干重、湿重直接衡量微生物群体的生物量； 通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算 微生物群体的生物量； 测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法 3、 生理指标法 .微生物的生理指标，如呼吸强度，耗氧量、酶活性、生物热等与其群体的规模成正相关。 ..样品中微生物数量多或生长旺盛，这些指标愈明显，因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量热计等设备来测定相应的指标。 常用于对微生物的快速鉴定与检测 微生物的特点： 个体微小 肉眼看到或接触到的微生物是成千上万个 单个的微生物组成的群体。 微生物接种是群体接种，接种后的生长是微生物群体繁殖生长。 三、微生物的群体生长 微生物群体生长可用生长曲线来表示 生长曲线(Growth Curve)： 定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的实验曲线。 对于单细胞微生物（如细菌和酵母），以培养时间为横坐标，细胞数目的对数值为纵坐标，可绘制出一条由延滞期、指数期、稳定期和衰亡期4个阶段组成的典型生长曲线。 在微生物学中提到的“生长”，均指群体生长。 细菌的生长曲线一般用菌数的对数为纵坐标作图 一条典型的生长曲线至少可以分为 延滞期，指数期，稳定期和衰亡期等四个生长时期 *