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流式细胞术检测急性杂合性白血病临床分析.docVIP

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流式细胞术检测急性杂合性白血病临床分析

流式细胞术检测急性杂合性白血病临床分析   [摘要] 目的 分析流式细胞术检测急性杂合性白血病的临床效果。 方法 对本院收治的急性杂合性白血病(HAL)患者、伴有淋系抗原表达型急性髓细胞白血病(Ly+AML)患者及伴有髓系抗原表达型急性淋巴细胞白血病(My+ALL)患者于治疗一、二疗程后分别行流式细胞术检测,对比检测结果。 结果 HAL患者在髓系CD33免疫表型的阳性率最高为95%,在B系CyCD22免疫表型的阳性率最高为75%,在T系CD7免疫表型的阳性率最高为30%,且在CD2、CyCD3、CD5中均有表达。第一、二疗程Ly+AML与My+ALL的诱导缓解率均明显高于HAL(P   [关键词] 流式细胞术;急性杂合性白血病;免疫学检测;临床价值   [中图分类号] R37 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2013)06(a)-0114-02   白血病属于造血干细胞的克隆性病变,以白血病细胞发生异常增殖、成熟分化障碍且伴凋亡减低为主要特征[1]。随着白血病诊断方法的逐渐成熟,目前流式细胞术(FCM)已被作为白血病的一种首选临床检测方式[2]。本院于治疗前后分别对急性杂合性白血病(HAL)、伴有淋系抗原表达型急性髓细胞白血病(Ly+AML)及伴有髓系抗原表达型急性淋巴细胞白血病(My+ALL)患者进行了FCM检测,现将检测情况报道如下:   1 资料与方法   1.1 一般资料   本次入选资料为本院2006年1月~2012年6月收治的72例免疫表型为二系以上的急性白血病患者。其中,男44例,女28例;年龄18~36岁,平均(25.31±6.29)岁;包括HAL 20例、Ly+AML 29例、My+ ALL 23例。全部患者均行骨髓涂片常规染色检查,过氧化物酶及糖原染色等相关细胞学染色检查;血液涂片均以常规瑞氏染色,读取100个细胞。   1.2 方法   1.2.1 标本提取 全部患者均于化疗前于本院采集骨髓液2~2.5 mL,EDTA抗凝,标本冷藏2~5℃环境下快速送到武汉康圣环球医学特检有限公司进行检测。   1.2.2 检测方法 使用流式细胞仪进行检测,型号XL2。单体克隆抗体,髓细胞系包括CD13、HLA-DR,B淋巴细胞系包括CD10、CD19、CD20、CyCD22、CD79a,T淋巴细胞系包括CD2、CD5、CD7、CyCD3。采取单克隆抗体三色荧光标记法,于每管样本内加入50 μL肝素抗凝,而后加入20 μL荧光抗体,充分混匀后置???室内背光处于室温下放置30 min,常规溶血处理后以PBS洗涤,以甲醛PBS稳定后上流式细胞仪检测,仪器每次记数104个以上细胞。   1.2.3 诊断标准 抗原表达 20%为阳性诊断标准[3]。诊断标准以欧洲AL免疫分型协作组(EGIL)所制订的积分标准执行[4]。   1.2.4 治疗方法 HAL患者给予淋系与髓系白血病联合化疗TA方案治疗:治疗第1~3天给予THP静滴20 mg/m2,第1~5天给予阿糖胞苷(Ara-C)静滴100 mg/m2[5];Ly+AML给予标准TA方案治疗,My+ALL给予VDLP方案进行治疗:第1、8、15、22天长春新碱1.4 mg/(m2·d),第1、8、15、22天给予柔红霉素(DNR)40 mg/(m2·d),第22~28天给予左旋门冬酰胺酶6000 U/(m2·d),第1~28天给予泼尼松60 mg/(m2·d)[6]。   1.2.5 观察方法 统计各系抗原表达阳性率;于治疗第一、二疗程后分别统计诱导缓解率并进行对比,Ly+AML、My+ALL分别与HAL进行对比。   1.3 统计学方法   使用SPSS 18.0软件进行数据检测,计数资料采用χ2检验,以P   HAL以髓细胞系与B淋巴细胞系的共同表达为主要特征,其次可表现为T系、B系与髓系的共同表达以及T系与髓系的共同表达。本次研究结果显示20例HAL患者中髓系与B系共同表达的10例,占比为50.00%;髓系、T系与B系共同表达的4例,占比为20.00%;髓系与T系共同表达的2例,占比为10.00%。HAL患者在髓系CD33免疫表型的阳性率最高为95.00%,在B系CyCD22免疫表型的阳性率最高为75.00%,在T系CD7免疫表型的阳性率最高为30.00%且在CD2、CyCD3、CD5中均有表达。这一结果提示白血病的细胞特异性与细胞分化发育的过程中存在的表面标记复杂性,有助于HAL发病机制的研究。20例HAL表达CD34与HLA-DR造血干细胞的标志性抗原,提示HAL早期的造血细胞发生恶性病变。   常规治疗方案对于HAL的临床疗效较差,第一疗程的缓解率明显低于AML与ALL,且易于复发。分析其原因,可能与HAL

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