参考mirna的作用机制及功能探讨进展课件.doc

中国科学 C辑:生命科学 2009年 第39卷 第1期: 109 113 109 《中国科学》杂志社 SCIENCE IN CHINA PRESS MicroRNA作用机制研究的新进展?赵爽 刘默芳 中国科学院上海生命科学研究院 生物化学与细胞生物学研究所 分子生物学国家重点实验室 上海 200031 联系人 E-mail: 收稿日期: 2008-09-04 接受日期: 2008-11-28 国家重点基础研究发展计划批准号: 2005CB724603和国家自然科学基金批准号:助项目 摘要 microRNAmiRNA是一种非蛋白质的新型基因表达调控因子 对真核生物基因表达起非常重要的调控作用. 关于miRNA的功能及作用机制方面的研究是当前生命科学研究的前沿热点?研究人员陆续提出了一些假说模型 诸如翻译起始抑制、翻译起始后抑制、mRNA降解、P小体Processing Body SGStress Granules颗粒扣押靶mRNA等来阐述miRNA 如何抑制其靶基因的表达. 此外 最近还有文献报道了一些全新的miRNA作用方式 如去抑制和miRNA 激活作用等. 本文将简要介绍一些miRNA作用机制研究的新进展及相关作用模型. 关键词 miRNA 负调控 去抑制 正调控 P小体 SG颗粒 准确的基因表达调控对生物体的生长发育和功能至关重要 基因表达调控异常是疾病发生的主要原因. 在过去的数十年间 对基因表达调控的研究主要集中在蛋白质转录因子介导的基因表达调控方面.?研究发现 它们通过激活或抑制基因转录控制基因的表达 在基因组信息转化为分子效应和生物效 应过程中发挥着重要的作用. 最近 在动、植物及病毒等生物中发现了一系列小分子非编码RNA small noncoding RNA 包括miRNAmicroRNA siRNA small interfering RNA piRNApiwi-interacting RNA和esiRNA endogenous siRNA等 它们分别在转录水平、转录后水平及表观遗传水平等方面控制基因的表达 组成了RNA 调控网络 调控包括细胞增殖、分化和凋亡等一系列生理进程 影响生物体的生长发育 并与多种人类疾病的发生密切相关1. 这些小分子RNA的发现 揭示了真核生物一种新的基因表达调控方式. miRNA是小分子非编码RNA家族的重要成员. miRNA与siRNA共用生成途径和作用途径中多种蛋白质因子. 但二者也有一些明显的区别 如siRNA主 要是由外源提供的小分子RNA 通过引发靶mRNA的切割负调控靶基因的表达 而miRNA是基因组编码的内源性小分子RNA 通常在翻译水平负调控靶 mRNA的表达. miRNA基因由RNA聚合酶或/和 转录23. 动物miRNA加工成熟一般需要两个RNase 家族酶——Drosha和Dicer参与. 最近发现AgoAr- gonaute蛋白在miRNA加工成熟中也发挥作用4. miRNA调控是通过RNA诱导基因沉默复合物RNA- induced silencing complex RISC完成的 复合物的核心成员是Ago 家族蛋白 还有一些功能未知、非RISC核酸酶活性必需的蛋白成分 如FXRP RNA 解旋酶等 也存在于复合物中56. 通常认为 miRNA与Ago1结合 组成miRNA效应器复合物miRNA- RISC miRISC 执行靶mRNA翻译抑制 而siRNA与Ago2结合 组成siRISC 执行靶mRNA降解7. 最近有人对这种miRNA/siRNA分选模型进行了校正 认为miRNA/siRNA都可以被Ago1或Ago2结合89 这为miRNA介导切割提供了可行性. 过去认为Dicer生产的miRNA: miRNA双链 miRNA作为向导链被组装入miRISC 互补链miRNA则被迅速降解. 但最 赵爽等: MicroRNA作用机制研究的新进展?110 近研究发现 虽然miRNA种类不如对应的miRNA丰富 但它们常常以适当的生理水平存在 并同样可以被Ago蛋白结合10. miRNA主要是通过5′端被称为种子序列Seed Sequence的7 nt序列与位于靶mRNA 3′UTR的miRNA调控元件miRNA Regulatory Element MRE相互作用 识别靶mRNA11. 一些靶mRNA 的其他特征 如MRE附近富含AU序列、靶mRNA与miRNA的1316位碱基配对、MRE距离终止密码子15 nt以外、不位于长3′UTR的中间、邻近共表达miRNA的识别位点等 可增加miRNA的作用效率12. miRNA与靶mRNA之间的配对程度决定了miRISC抑制靶mRNA的方式: 高度配对的miRNA 如大部分植物miRN