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仪器分析——液相色谱
高效液相色谱法;主要内容:;一:与经典液相柱色谱法比较:;与气相色谱法比较:;二:液相色谱的优缺点:;三:高效液相色谱法的分类;吸附色谱;分配色谱;⑵.反相分配色谱( Reversed Phase Chromatography ),固定相的极性小于流动相的极性。
非极性固定相 :如C18,C8, CN等
→ 共价结合到载体上的固定相是一些直链饱和碳氢化合物,如正辛基等。
流动相:极性溶剂,如水、缓冲液,甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等有机溶剂
→ 非极性的化合物后流出
→ 适用于分离非极性和极性较弱的化合物
;离子色谱;体积(空间)排阻色谱;亲和色谱;高效液相色谱法分离模式的选择;;容量因子(k’)
选择性(?)
分离度 (R)
;五:溶剂前处理;六:样品前处理;1:抽样
试样要均匀
有代表性
2:样品的制备
样品的制备是依据不同的样品特性差异而不同。在食品残留分析中,一般来说是取可食部分制备样品(除非有其他要求)。加工食品,一般按照原样制备实验室样品(如浓缩产品、脱水食品)。 ;3:样品提取和净化
液-液萃取 (LLE)
固相萃取(SPE)
基质固相分散技术(MSPD)
柱切换技术
超临界流体萃取
固相微萃取(SPME)
免疫亲和色谱(IAC)
; 液-液萃取 (LLE)
相似相溶原理,极性组分易溶于极性溶剂,反之亦然。
液-液萃取是经典的提取方法之一,它基于被测组分在互不相溶的两种溶剂中的分配。
固相萃取是以液相色谱分离机制为基础建立起来的分离、纯化方法。
固相分离有两种实现样品纯化的途径。一种是保留杂质,待测组分不被保留而自然流出或者被洗脱;更为常用的一种途径是先使待测物完全保留在柱上,使干扰杂质随样品溶剂或洗涤液洗出,然后以小体积溶剂洗脱待测物。
与经典的液-液萃取法相比,固相萃取的优点有:(1)快速,一般5min内即可完成;(2)回收率高,通常超过90%;(3)精密度比较好;(4)样品用量少,有一定的选择性,无乳化现象等。;七:使用中常见的一些问题;;;;;;谢谢
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