第七章化学人工酶和酶的非水相催化精选资料.pptVIP

* * * * * * * 脂肪酶的选择 脂肪酶来源 时间（小时） 转化 (%) E 产碱杆菌 52 51.4 5 节杆菌 52 23.9 ?1 圆柱形假丝酵母 52 20.9 ?1 假单胞菌 10 48.3 16 反应温度30℃，酰基供体 乙酸乙烯酯，正己烷体系 * 对映选择性由参数E表示， E = ln[(1- c)·[1-ee(S)]]/ln[(1- c)·[1+ee(S)]] c： (R,S)-4-甲基-1-庚炔-4-烯-3-醇的酯化分数 ee(S)（低好）为([S] – [R]/([S] + [R])，其中[S]和[R]分别对应酶反应后残留的S和R异构体浓度。 E高好，高代表选择性高 * 酰基供体的选择 酰基供体 时间（小时） 转化率 (%) Eb 乙酸乙烯酯 10 48.3 16 乙酸异丙酯 50 45.4 18 乙酸乙酯 29 2.1 - 无水乙酸酐 29 68.5 ?5 * 溶剂的选择 有机溶剂在辛醇——水两相体系中的分配系数对数值（logP）作为有机溶剂疏水性的度量。有机溶剂分别为（水浓度，W/V）：1.正己烷（0.009%）；2.环己烷（0.005%）；3.甲苯（0.02%）；4.苯（0.007%）；5.吡啶（0.04%）；6.四氢呋喃（0.04%）；7.乙腈（0.1%）；8.二噁烷（0.1%）。 在疏水程度最大的溶剂（正己烷）介质中，获得最高初反应速率。 * 溶剂的选择 * 溶剂中水的影响 在正己烷体系中水浓度对冷冻干燥假单胞菌脂肪酶的相对转酯化活性的影响。在反应混合物最低水浓度条件下（0.017 W/V %），脂肪酶的水浓度为0.8 W/W %（从反应混合物中过滤分离脂肪酶），液相水浓度为0.009 W/V %。通过提高脂肪酶的湿度或向反应混合物中加入水，获得反应混合物的水浓度。 * 溶剂中水的影响 * 温度的影响 在含有0.017%（W/V）水浓度的正己烷体系中，温度对假单胞菌脂肪酶催化（R,S）4-甲基-1-庚炔-4-烯-3-醇和乙酸乙烯酯转酯化反应的影响。 酯基转移作用的初速率和绝对温度关系的阿仑尼乌斯图是线性的，说明酶催化反应和理想化学反应的行为相似。 * 温度的影响 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 优势 1、省去了单克隆抗体制备过程中许多费时费力的过程。 2、细胞水平进入分子水平 3、重轻链的随机组合提高了抗体的多样性，人工突变 4、花费时间少（1-2周与数月） 5、适合非细胞工程实验室 6、也可用于抗体的制备 * 五、分子印迹 分子印迹(Molecular Impriting)：一种模拟抗体—抗原相互作用的人工生物模板技术， 1972年由德国的wulff提出。可以针对不同的目的，采用人工合成的方法，构造出具有特定选择性识别位点的模板聚合物，这种聚合物可作为酶，用于生物物质的分析、检测、分离与纯化以及酶的模拟和催化合成等。化学模拟酶催化剂与天然的生物酶催化剂相比,具有抗恶劣环境的能力,表现出高度的稳定性和长的使用寿命 * 对特定分子(印迹分子或称模板)具有选择性的聚合过程。包括： (1)选定特定分子和单体，让它们之间发生互补作用。 (2)在印迹分子一单体聚合物周围发生聚合反应。 (3)用抽提法从聚合物中除去印迹分子。则聚合物中留有恰似印迹分子的空间，可用于高分子高选择性分离材料。 从人工酶角度来看，若用过渡态类似物作为印迹分子，则所得聚合物具有相应的催化活性，此时代替抗体的只是人工聚合物。 * * * 应用实例 1　手性异构体拆分将 印迹聚合物作为高效液相色谱的固定相用于分离多肽,蛋白质,核糖核蛋白及各种糖类分子。 2　药物分析 基于针对不同印迹分子可设计合成出不同的印迹高聚物这一点,Vlatakis等在1993年提出了一种新的放射性标记配体结合分析方法(MIA)测定人体血清中的药物。 * 3　药物控制释放 印迹高聚物可以吸收大量与印迹分子结构相似的物质,可以被用来做为一种反应性控制释放载体（竞争抑制）。 * 第四节 非水介质中的酶催化反应 有机溶剂反应介质，气相反应介质，超临界流体反应介质超临界流体是温度和压力同时高于临界值的流体，亦即压缩到具有接近液体密度的气体。超临界流体的密度和溶剂化能力接近液体，粘度和扩散系数接近气体， 优点： (1)提高脂溶性底物的溶解度，有利于高浓度底物连续（因为酶在有机溶剂里不溶）生物转化。 (2)水解酶能催化合成反应（因为没有水，向逆反应进行），如脂的合成和肽的合成。 (3)可以控制由水引起的副反应(如酸酐的水解)。 * (4)酶不溶于有机介质，易于回收再利用。 (5)酶的固定化简单（因为酶