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HPLC法测定恩替卡韦原料有关物质 　　摘 要：目的：建立高效液相色谱法测定恩替卡韦有关物质的方法。方法：色谱柱为KromasilC18（250mm×4.6mm，5μm），以乙腈-水-三氟乙酸（100：900： 1）为流动相，流速为1ml﹒min-1，检测波长为254nm。结果：在本方法中，恩替卡韦的线性关系良好，r为0.9999；专属性强，恩替卡韦与各中间体及各降解产物之间都有良好的分离度；精密度和稳定性良好，RSD均小于2%。结论：该方法准确、简便、快速，可用于恩替卡韦的有关物质测定。 　　关键词：恩替卡韦 有关物质测定 高效液相色谱法 　　Determination of EntecavirTablets by HPLC 　　Zhao Hai-qiao Chen man Zhao Ji-fang 　　（Shandong Fangming Pharmaceutical Group CO.，LTD.，Dongming 274500 ，China） 　　Abstract：Objective To establish a method for the determination of Entecavirby HPLC.Methods The determination was carried out on Kromsil C18column，with Acetonitrile-water- Trifluoroacetic acid （100：900： 1） as the mobile phase at the flow rate of 1.0ml？min-1 .The detection wavelength was 254nm. Results The method showed good linearity with a correlation coefficient （r） of 0.9999； the precision and stability were satisfactory with all RSDs below 2%. Conclusion This method is an accurate，fast and simple method for the determination of Entecavirtablets. 　　Key word： entecavir determination HPLC 　　恩替卡韦是由美国百时施贵宝（Bristol – Myers Squbb）公司在20世纪90年代开始研制开发的一种新型抗乙肝病毒新药，主要用于治疗成人伴有病毒复制活跃和血清转氨酶持续增高，或肝组织学为活动性病变的慢性乙型肝炎，是目前降病毒最快最强、变异几率最低的核苷类似物。恩替卡韦是新一代抗 HBV核苷类似物药物，因其具有高效的抗病毒治疗作用和极低的耐药率而成为抗病毒治疗的首选。本文建立的方法，方法简便，结果可靠。 　　一、仪器与试药 　　1.仪器 　　日本岛津 SPD-20A高效液相色谱仪。 　　2.试药 　　恩替卡韦对照品（山东方明药业集团股份有限公司，1203001）；乙腈、三氟乙酸为色谱纯；水为纯化水；其它试剂均为分析纯；恩替卡韦（山东方明药业集团股份有限公司；批号：1310001、1310002、1310003） 　　二、方法与结果 　　1.色谱条件 　　色谱柱为KromasilC18（250mm×4.6mm，5μm），以乙腈-水-三氟乙酸（10：900： 1）为流动相，流速为1ml﹒min-1，检测波长为254nm，柱温为30℃，进样量为20μl。 　　2.供试品溶液的制备 　　取恩替卡韦对照品约20mg，精密称定，置100ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为供试品溶液。 　　3.对照溶液的制备 　　精密量取恩替卡韦供试品溶液0.1ml，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。 　　4.专属性试验 　　破坏试验：取恩替卡韦适量置100ml容量瓶中，照下述方法试验：（1）加1.0mol/L盐酸溶液2ml并放置8小时作为酸破坏样品；（2）加1.0mol/L氢氧化钠溶液2ml并放置8小时作为碱破坏样品；（3）加3%过氧化氢溶液2ml并放置8小时作为氧化破坏样品；（4）置4500lx光照度下8小时作为光照降解样品。结果表明：恩替卡韦对酸、碱、氧化剂及光照均较稳定，各降解产物分离度良好。 　　5.线性关系考察 　　精密称取恩替卡韦对照品约20.0 mg，精密称定，置100ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为储备液，精密量取储备液1ml置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为溶液①，精密量取溶液①2.0，1.0，1.0，