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HPLC法测定阿戈美拉汀片含量 　　摘 要：目的 建立高效液相色谱法测定阿戈美拉汀片含量的方法。方法 采用Welchrom-C18（5？m，4.6*250mm）色谱柱，以0.01mol/L的磷酸氢二钠溶液（用稀磷酸调节pH值至3.0）-甲醇-乙腈（55：25：20）为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长为229nm，柱温为30℃。结果 线性回归方程为：A=266138C+94983，r=0.9997（n=6），阿戈美拉汀在4.04～15.15μgoml-1范围内线性关系良好，平均回收率为99.60%（n=9）。结论 该方法专属性强、重复性好，可用于阿戈美拉汀片的含量测定。 　　关键词：阿戈美拉汀片 含量测定 高效液相色谱法 　　阿戈美拉汀片（Agomelatine Tablets）是法国施维雅药厂（Les Laboratoires Servier Industrie）研制的新一代抗抑郁药，于2009年6月在欧洲首次上市。阿戈美拉汀有抗抑郁、抗焦虑、调整睡眠节律及调节生物钟的作用，可在不影响白天活动的情况下改善夜间睡眠状况，其不良反应少，具有广阔的市场前???。为有效控制产品质量，本文采用高效液相色谱（HPLC）法[1]，参考有关文献[2]对阿戈美拉汀片进行含量测定，结果该方法专属性强、重复性好，可用于阿戈美拉汀片的含量测定。 　　一、仪器与试药 　　高效液相色谱仪（岛津，SPD-20AT检测器，LC-20AT泵），UV2450紫外-可见分光光度计（岛津）。 　　阿戈美拉汀对照品（山东方明药业集团股份有限公司，批号：120301J，含量：99.7%）；阿戈美拉汀片（山东方明药业集团股份有限公司，批号20120502规格：25mg）；甲醇、乙腈、磷酸为色谱纯；磷酸氢二钠为分析纯，水为纯化水。 　　二、方法与结果 　　1.色谱条件 　　采用Welchrom-C18柱（4.6*250mm，5μm），以0.01mol/L的磷酸氢二钠溶液（用稀磷酸调节pH值至3.0）-甲醇-乙腈（55：25：20）为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长为229nm，柱温为30℃；进样量：20μl。 　　2.溶液的配制 　　精密称取阿戈美拉汀对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml含10μg的溶液，作为对照品溶液。取阿戈美拉汀片研细，精密称取适量（约相当于阿戈美拉汀25mg），置100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。 　　3.方法学考察 　　3.1 测定波长的选择 　　取阿戈美拉汀对照品适量，用流动相溶解稀释制成每1ml含10μg的溶液，照紫外-可见分光光度法在200～400nm范围内扫描，结果阿戈美拉汀在229nm处有最大吸收，故选择229nm为测定波长。 　　3.2专属性考察 　　取阿戈美拉汀合成工艺中所需起始原料及中间体适量，用流动相溶解，取适量加入到阿戈美拉汀对照品中，用流动相稀释制成含起始原料及中间体各1%的混合溶液，量取20μl注入色谱仪，记录色谱图，结果阿戈美拉汀与起始原料及中间体的分离度均符合规定。 　　破坏性试验：取阿戈美拉汀片样品，经酸、碱、氧化、高温、光照破坏后，按“1”项下色谱条件进行测定，结果各降解产物与主峰分离度良好。 　　辅料溶液干扰试验：按处方取空白辅料适量，加流动相溶解并稀释制成约相当于含阿戈美拉汀10μg/ml的溶液，按“1”项下色谱条件进行测定，结果空白辅料不干扰含量测定。 　　3.3 线性关系试验 　　取阿戈美拉汀对照品约25mg，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备溶液，精密量取0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml、1.4ml，分别置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积（A）为纵坐标，以浓度（C）为横坐标，进行线性回归，得回归方程：A=266138C+94983，r=0.9997（n=6），结果表明阿戈美拉汀在4.04～15.15μg/ml浓度范围内线性关系良好。 　　3.4 精密度试验 　　照“2”项下方法配制对照品溶液，取20μl，连续进样6次，RSD为1.1%，表明本方法精密度良好。 　　3.5 稳定性试验 　　照“2”项下方法制备供试品溶液，室温下在0、2、4、6、8小时分别测定。结果，供试品溶液在室温条件下放置8小时内，RSD为1.2%，表明供试品溶液在室温条件下放置8小时内稳定性良好。 　　3.6 定量限 　　取阿戈美拉汀对照品适量，用流动相溶解稀释至适当浓度，20？l进样，使其主峰高约