parp抑制剂研究进展 pt课件.pptx

PARP抑制剂研究进展 徐度建 2015.6 细胞毒药物 定义：以DNA、RNA和微管蛋白等对细胞死攸关的共有组分为靶点 特点：当前肿瘤治疗药物的主体，同时作用于肿瘤细胞和正常细胞,对实体瘤疗效差、毒副作用大、耐药性 分子靶向药物 定义：靶向于正常细胞和肿瘤细胞中差别巨大的调控细胞增殖生长 的关键分子及其信号转导通路的抗肿瘤药物 特点：当前肿瘤药物研发的主要方向，特异作用于肿瘤细胞，选择 性高、毒性低 细胞毒药物vs分子靶向药物 2 分子靶向抗肿瘤药物主要分类 DNA损伤修复系统  泛素化-蛋白酶体系统  表观遗传修饰系统 肿瘤免疫治疗 肿瘤代谢  细胞信号转导 蛋白酪氨酸激酶 丝/苏氨酸蛋白激酶  肿瘤新生血管生成  胞外基质  细胞周期 细胞凋亡 DNA损伤修复系统 化疗是恶性肿瘤的主要治疗手段之一,其主要通过破坏肿瘤细胞DNA以达到杀死肿 瘤细胞的目的 肿瘤细胞可以通过DNA修复途径修复受损DNA,提高自身生存能力,增强自身对化疗药物的耐受性 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP） 聚腺苷二磷酸核糖合成酶(PARS)或聚腺苷二磷酸转移酶(PADPRT) , 是细胞核酶核酶的一种基本组成部分 PARP-1 PARP-2 PARP-3 Vault-PARP Tankyrases ( TANK-1, TANK-2 ,和TANK-3)等亚型 PARP-1主要功能区域 相对质量为46KD的酶分子的N端部分,大量碱性氨基酸,包括DNA结合区域(有两个“锌指”结构)和核酸定位区域,这个区域通过锌指结构识别DNA的损伤 一个22kD的中心自修饰区域,包含15个高度保守的谷氨酸残基,被认为是自身聚腺苷二磷酸核糖化的靶位.靠近羧基端含有与DNA修复有关的乳腺癌易感蛋白C端模序（BRCT），BRCT可以介导DNA修复蛋白和细胞检查点蛋白之间的相互作用。 54kD的C端区域,包括NAD+的结合位点和合成聚腺苷二磷酸核糖的催化位点 PARP生理功能 当DNA的双链或单链由于辐射、氧化剂和烷基化药物等作用出现断裂时, PARP的活性会显著增强。一旦被激活, PARP迅速消耗大量NAD+,将其转化为烟酰胺和聚ADP-核糖 聚ADP-核糖被用来合成聚腺苷 二磷酸核糖,导致PARP的自身修饰。接着聚腺苷二磷酸核糖水解酶(PARG)被激活,将聚腺苷二磷酸核糖从PARP上移除,使得PARP-1重新活化,继续转化NAD+ PARP的生理功能 在PARP介导的多腺苷二磷酸核糖代谢过程中, NAD+通过氢键与PARP相结合, 并在PARP的作用下裂解成烟酰胺和ADP核糖, 而烟酰胺作为PARP催化NAD+裂解的产物之一，其本身也能抑制PARP。因此, 早期的PARP抑制剂多以烟酰胺为基础发展而来 8 PARP抑制剂 典型的PARP1抑制剂都有共同的与PARP1与Gly863 -NH2和Ser904 -OH分别有氢键作用,母核上甲酰胺基团的-NHGly863的-C(=0)-也会产生氢键,此外,芳香母核与Tyr907和Tyr889的苯环产生共轭 苯并咪唑类 2-位取代基为环烷基胺或芳香胺时具有较好的活性，可能是因为胺基与Glu-763发生结合，而环烷基与芳基与Tyr-889通过范德华力作用进一步加强其作用 NU108516(Ki = 6 nM, ) 先导化合物，但是该先导化合物仍然存在水溶性差的问题。为了解决水溶性问题， 以及提高结构的新颖性， 酰胺键被固定在六元环或者七元环结构中 Pfizer Rucaparib （AG 014699） Phase 3 10 Veliparib(ABT-888) 为了提高先导物的水溶性和细胞活性, 用2-脂肪胺替代的2-苯基,成功地得到一系列具有优良酶活性和细胞活性的小分子，A 620223体内试验表明, 具有良好的活性与药物代谢性质。但是在孕鼠体内, 被发现有严重的胚胎致死性,因而阻止了该化合物进入临床 2-偕二甲基苯并咪唑-4-甲酸胺类小分子，不但活性很好,还具有极好的水溶性对细胞色素P450s 几乎无抑制作用然而,它的半衰期很短，生物利用度低 利用前述化合物的2-环胺基和2-季碳取代基，活性与药物代谢性质俱佳的化合物veliparib(ABT-886)，(R)-veliparib具有更好的口服生物利用度 11 菲啶酮类 Inotek 公司合成了一系列治疗缺血的菲啶酮类 PARP-1 抑制剂。在 2 位引入叔胺得到化合物 PG34，有效地改善了水溶性 三环的大平面性使其倾向于插入DNA造成DNA损伤,因此Intoek制药公司将环戊环并以破坏其大平面性,但PARP1酶活性和细胞活性几乎完全消失 8位引入较小基团时活性提高10倍,如-F,-N02, -NH2,引入较大基团时活性会逐渐下降甚至完全消失。9