1例用玻片凝集法鉴定老年患者血型错误原因分析.docVIP

1例用玻片凝集法鉴定老年患者血型错误原因分析 　　摘要：目的 生理盐水玻片凝集法测定老年患者血型，交叉配血发现血型鉴定错误，查找原因。方法 玻片法，试管法，正定型，反定型，生理盐水交叉配血实验；方法学原理：根据红细胞膜表面有无A抗原和（或）B抗原，将血型分为A，B，AB，O型4种。可利用红细胞凝集试验，通过正反定型准确鉴定ABO血型。正定型是指用标准抗A抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或（和）B抗原；反定型，是指用标准的A型、B型细胞来测定血清中有无抗A和（抗B）。结论 可以通过试管凝集法检测发现老年体弱患者血中较弱的抗原，从而正确鉴定血型，合理交叉配血，可为临床手术，外伤失血等合理输血提供有力的医疗保障。 　　关键词：血型鉴定；玻片法；试管法；注意事项 　　笔者曾在基层医院遇到过1例88岁的老年患者，因摔倒后30min诊断为股骨骨折收住院，遵医嘱进行手术前验血备血。立即抽取患者血液3.0ml，以 1500转/min离心分离血清，用生理盐水凝集法（玻片法）鉴定患者ABO血型，鉴定结果：患者红细胞悬液与抗A与抗B血清均不发生凝集（红细胞均匀散在）判定为O型RH（+），与O型献血者血液交叉不符（次侧管出现红细胞凝集和溶血现象），同型血相输主侧和次侧均不应凝集。查找原因发现，老年患者由于ABO血型抗原性较弱，用玻片法鉴定出现假阴性（本应为B型，老年人的红细胞应与A型血清抗B抗体发生凝集），结果出现假O型（老人红细胞与A和B血清均不凝集，出现红细胞均匀散在现象）与O型献血者交叉出现：次侧管凝集和溶血的异型血型交叉配血现象），改用试管法鉴定该老年患者真正血型为B型（+），与B型献血者交叉配血结果相符（即主侧管和次侧管红细胞均无凝集无溶血现象），通过严格筛选了B型RH（+）的B型悬浮红细胞3.0U与患者进行血液交叉配合血型相符，未出现输血不良反应。患者安全度过手术关，?年94岁。 　　1 实验方法和步骤 　　1.1操作方法 　　1.1.1用生理盐水玻片凝集法鉴定 将贮存于-4℃冰箱的抗A和抗B标准血清取出放置至室温，将以上抽取的患者红细胞用0.9%的生理盐水反复洗涤数次，制备成红细胞悬液备用。分别取患者??红细胞悬液各1滴加到载玻片上，再分别加入抗A标准血清1滴和抗B标准血清1滴，RH抗D血清1滴，10min后观察结果。该患者被鉴定为O型RH（+）（即抗A侧和抗B侧红细胞均不出现凝集，红细胞呈游离散在现象）。 　　1.1.2交叉配血 取O型献血者血液3.0ml，1500转/min离心分离血清，同样用0.9%的生理盐水洗涤献血者红细胞制成红细胞悬液。取试管2支，分别用玻璃蜡笔注明主侧和次侧。主侧管加入患者的血清4滴，献血者的红细胞悬液4滴，次侧管加入献血者的血清4滴，患者的红细胞悬液4滴，分别轻轻摇匀，平衡后放入离心机以1500转/min离心1～2min，取出试管观察结果：主侧管无凝集，无溶血，次侧管有凝集，微溶血现象与同型血交叉不符，查找原因用试管法鉴定发现该患者血型为B型RH（+），而不是O型RH（+）。 　　1.2解决办法 用已知的A型献血者与患者血液用试管法鉴定血型。即取2支试管，1支试管加入患者的血清2滴，A型献血者洗涤后的红细胞悬液（含A抗原）2滴；第2支试管加入患者洗涤的悬浮红细胞2滴，A型献血者的血清（含有抗B抗体）2滴，以同样方法离心10min后观察结果显示：第1管红细胞出现凝集，推断与A抗原发生凝集反应的 血清中含有抗A抗体（B型和O型人的血清中才含有抗A抗体），但O型与以上O型献血者做血型交叉结果不符，故排除O型的可能；第2管红细胞凝集，推断与抗B抗体发生凝集反应的红细胞上含有B抗原（B型和AB型的红细胞上含有B抗原），取B型和AB型红细胞悬液分别与抗B血清与抗A血清试管法鉴定，发现与抗B血清有少量凝集与抗A血清不凝集，故排除 AB型，RH血型均为阳性，综上所述可以得出结论，该患者真正血型为B型。因为老年患者抗原性较弱，用玻片法没有发现弱凝集，用试管法离心后发现弱凝集。 　　在10多年以前，很多基层医院连一个专业的检验员都没有，更谈不上做血型亚型，RH血型鉴定，凝胶微柱法等等的检测条件，靠的就是细心和经验累积。本人在基层医院工作了20年从未发生过输血医疗事故，也带过不少的非专业和专业的学员，纠正过学员鉴定血型的错误，现总结一点经验与基层的同仁们共享。 　　1.3鉴定血型交叉配血一定要注意以下几点 　　1.3.1红细胞标本问题 ①未加入抗体和血清；②实验室温度（37℃以下凝集力减弱）；③未识别溶血；④血清与红细胞比例不当；⑤离心速度与时间不够；⑥使用失效或错误试剂；⑦实验器皿不干净；⑧一些疾病致红细胞的抗原性太弱，应用抗A和抗B试剂未能出现预期的凝集反应；⑨使用未洗涤的红细胞标本，其表面