吴茱萸次碱羟丙基—β—环糊精包合物制备工艺研究.docVIP

吴茱萸次碱羟丙基—β—环糊精包合物制备工艺研究 　　[摘要] 吴茱萸次碱（rutaecarpine，Rut）是吴茱萸中提取的一种吲哚喹唑啉类生物碱，研究表明吴茱萸次碱有抗高血压、抗癌、抗炎、抗血栓形成等多种药理学作用，目前许多学者正致力于将其开发成一种全新作用机制的抗高血压、抗炎药物，但是研究发现吴茱萸次碱属于既难溶于水又难溶于油的高脂溶性药物，Rut的高度难溶性是其口服吸收应用的主要障碍，极大的降低了吴茱萸次碱的生物利用度，因此本实验以羟丙基-β-环糊精（HP-β-CD）为包合材料制备Rut包合物，以提高吴茱萸次碱的水溶性和生物利用度。该实验采用搅拌法-冷冻干燥法制备Rut-HP-β-CD包合物，以包合率为指标，运用正交试验法，以主客分子摩尔比、包合温度、包合时间、搅拌速度为影响因素，优化 Rut-HP-β-CD 包合物的制备工艺。通过考察表观溶解度、薄层色谱、显微鉴别和熔点测定、溶出度考察等方法验证包合物。结果显示当Rut与HP-β-CD摩尔比为1∶1，温度60 ℃、包合时间 4 h、搅拌速度600 r·min-1的条件下制备Rut-HP-β-CD 包合物，包合率达 91.04%，工艺优化成功。因此以最佳工艺条件制备的 Rut-HP-β-CD 包合物制备工艺简便、易行，包合率高，重复性好，能显著提高Rut的溶解度及生物利用度，为吴茱萸次碱的临床应用提供了可靠实验基础。 　　[关键词] 吴茱萸次碱；羟丙基-β-环糊精；包合物；正交试验 　　[收稿日期] 2013-09-23 　　[基金项目] 河北省卫生厅医学科学研究重点课题；张家口市科技局科技计划指导项目） 　　[通信作者] *严春临，硕士，讲师，主要从事中药药剂学与药物动力学研究，TelE-mail：yanchunlinycl@163.com 　　吴茱萸次碱（rutacarpline， Rut）为芸香科吴茱萸属植物Ruticarpum干燥将近成熟果实中提取的生物碱之一，有保护心脏、舒张血管、降低血压、抗炎、影响药物代谢、影响内分泌系统、影响免疫及过敏反应等作用[1-2]。吴茱萸次碱可溶于丙酮、乙醚等有机溶剂，但几乎不溶于水，极大的降低了吴茱萸次碱的生物利用度，从而限制了吴茱萸次碱制剂的临床应用。包合技术是改善难溶性药物溶解性的方法之一。羟丙基-β-环糊精（hydroxypyopyl-β-cyclodextrin， HP-β-CD）具有亲水表面与疏水内腔，在水中有较好的溶解性能，可将脂溶性药物分子包藏于包合材料的疏水内腔中，而发挥提高疏水药物溶解度的作用[3]。本实验以HP-β-CD为包合材料，采用搅拌法制备吴茱萸次碱包合物，通过测定包合物的包合率，筛选出最佳制备工艺，从而解决吴茱萸次碱水溶性差的缺点，为吴茱萸次碱制成新型药剂提供理论依据。 　　1 材料 　　高效液相色谱仪（Waters）；UV9100 DPC紫外分光光度计（北京莱博泰科仪器有限公司）；MP470全自动熔点仪（济南海能仪器股份有限公司）；BSA2235电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；85-2A测速数显恒温磁力搅拌器（常州朗越仪器制造有限公司）；OLYMPUS-CX31型显微镜（日本奥林巴斯株式会社）；LL1500冷冻干燥机（美国 Themo Fisher）。 　　吴茱萸次碱对照品（批号110802-201006，中国食品药品检定研究院）；吴茱萸次碱（批南京泽朗医药科技有限公司）；HP-β-CD（批西安德力生物化工有限公司）；乙腈（色谱纯）；甲醇（色谱纯）；其他试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 检测方法的建立 　　2.1.1 检测波长的选择 取Rut对照品用色谱纯甲醇溶解，在200～900 nm进行扫描，Rut在219，348 nm有吸收，但219 nm末端吸收效应较大，同时，空白辅料用同样方法进行扫描，在348 nm处无吸收，不干扰Rut的测定，因此选择348 nm作为检测波长。 　　2.1.2 色谱条件 Elite C18色谱柱 （4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相乙腈-水（80∶20），柱温35 ℃，检测波长348 nm，流速1.0 mL·min-1，进样量20 μL。外标法定量。色谱图见图1。 　　A.Rut对照品；B.阴性对照； C.空白包合物；D.Rut-HP-β-CD 包合物样品；1.吴茱萸次碱。 　　图1 不同样品的高效液相色谱图 　　Fig.1 HPLC chromatograms of different samples 　　2.1.3 线性范围考察 称取Rut对照品 10.0 mg，置于100 mL量瓶中，用甲醇溶