抗氧能力检测方法评估及微型化.docVIP

抗氧化能力检测方法评估及微型化 高月红1，郑建普1，朱春赟1，可 燕1,2，(卞 卡1,2,3 1 上海中医药大学穆拉德中药现代化研究中心 上海 201203 2上海高校一氧化氮与炎症医学E研究院 上海 201203 3 美国德克萨斯大学休斯顿医学院综合生物及药理学系，德克萨斯大学分子医学研究所 休斯顿 TX 77030 摘要 目的 现有抗氧化能力检测方法评估, 建立微型化抗氧化能力检测方法，加速抗氧化物质的筛选。 方法 考察FRAP、DPPH方法学的基础上, 建立微型FRAP、DPPH法，并通过微型FRAP、DPPH法对内源性抗氧化剂（维生素C、维生素 E、GSH、α-硫辛酸、β-胡萝卜素）和外源性抗氧化剂（白藜芦醇）进行抗氧化能力检测，以考察其灵敏度和专属性。 结果 微型FRAP、DPPH法具有良好的线性、精密度、回收率。与传统FRAP、DPPH方法相比，不仅简便、快速、样品用量大大减少外，对Trolox、白藜芦醇、茶多酚的检测结果非常相近。微型FRAP法和DPPH法的灵敏度考察（0.1 mmol/L物质）和专属性考察（1 mmol/L物质）结果显示, 两种微型法对维生素 E、维生素C和白藜芦醇都有很好的灵敏度和专属性。 结论 1) 微型抗氧化能力检测方法可以加速评价物质的抗氧化能力。 2) 微型抗氧化能力检测与传统紫外法相比，在评价质量上没有明显区别。 3) 微型抗氧化能力检测方法对内源性和外源性抗氧化物质均显示很好的灵 敏度和专属性。 关键词 FRAP 法；DPPH法；抗氧化剂( Evaluating and miniaturizing the assays for antioxidant capacity measurement GAO Yue-hong1, Zheng Jian-pu1,Zhu Chun-yun1, KE Yan1,2, (BIAN Ka1,2,3 1 Murad Research Institute for Modernized Chinese Medicine, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine; Shanghai 201203, PR China. 2 E-Institute of Shanghai Universities, Division of Nitric Oxide and Inflammatory Medicine. Shanghai 201203, PR China. 3 Department of Integrative Biology and Pharmacology, Institute of Molecular Medicine, University of Texas Medical School, 6431 Fannin, Houston, TX 77030, USA. Abstract Objective: To evaluate and miniaturize the assays for antioxidant capacity measurement and accelerate screen of herb-derived antioxidants. Methods: Based on the studies of FRAP and DPPH assays, a set of miniaturized 96-well FRAP and DPPH assays was developed. The parameters such as sensitivity and specificity of miniaturized assays have been evaluated via the measurement of antioxidant capacity of different substances, including endogenous antioxidants (Vitamin C, Vitamin E, GSH, α-lipoic acid, and β-carotene ) and exogenous antioxidants (Resveratrol and Tea polyphenols). Results: 96-well FRAP assay and DPPH assay demonstrated considerable quality of linearity, accuracy, and recovery rate. Comparing with traditional FRAP assay and DPPH as