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- 2018-11-03 发布于福建
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细胞工程第三节 植物细胞浮培养
1、定义:液体培养基中能保持良好分散状态的 细胞和小细团的培养。 2、优点: (1)充分吸收营养 (2)细胞增殖快 (3)可进行大规模的培养 一、细胞悬浮培养原理 植物离体培养可产生愈伤组织, 将疏松型的愈伤组织悬浮在液体培养基中并在振荡条件下培养一段时间后,可形成分散悬浮培养物。 细胞的悬浮培养示意图 (二)植物细胞悬浮培养的特性 1.植物细胞较微生物细胞大得多,有纤维素细胞壁.细胞耐拉不耐扭,抵抗剪切力差; 2.培养过程生长速度缓慢,易受微生物污染,需用抗生素; 3.细胞生长的中期及对数期.易凝聚为直径达350μm一400μm的团块,悬浮培养较难; 4.培养时需供氧,培养液粘度大: 5.具有群体效应; 6. 因为有细胞壁, 培养细胞产物滞留于细胞内,产量较低; 7.细胞培养过程有结构与功能全能性,因而易分化,从而导致目的产物低于原植物体内浓度; 8. 悬浮培养中要求有一定的细胞浓度,否则不生长(25000~50000个/ML)。 二 、培养方法 植物细胞悬浮培养通常深层培养可分为:分批式.流加式.半连续式.连续式.和灌注式五种。 分批式培养(batch culture) 该方式大多采用机械搅拌式生物反应器,将细胞扩大培养后,一次性转入生物反应器内进行培养,在培养过程中其体积不变,不添加其它成分,待细胞增长和产物
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