task-1,-2和-3钾离子通道在人mg63细胞中的表达和定位-expression and localization of task - 1, - 2 and - 3 potassium channels in human mg63 cells.docxVIP

中文摘要目的 研究双孔钾离子通道 TASK-1、TASK-2 和 TASK-3 在人 MG63 细胞中的 表达及分布，并探讨其对人 MG63 细胞增殖的作用。方法用 RT-PCR 和 Western Blot 分别在 mRNA 和蛋白质水平检测 TASK-1，-2，-3 在人 MG63 细胞中的表达情况；用免疫荧光的方法检测 TASK-1，-2，-3 通 道蛋白的存在，并确定其表达的位置；将 MG63 细胞分别在 PH6.4、6.9、7.4、7.9 的环境中培养 12h、24h 和 48h 后 CCK-8 法检测细胞增殖情况。结果 RT-PCR 在 mRNA 水平验证了 TASK-1，-2，-3 通道在人 MG63 细胞中表 达；进而 Western Blot 实验技术表明 TASK-1，-2，-3 的 mRNA 在人 MG63 细胞中 能够翻译为相对应的蛋白质；免疫荧光分析证明了 TASK-1，-2，-3 离子通道定位 于细胞膜及细胞核周围；CCK-8 细胞增殖实验显示酸中毒条件下，人 MG63 细胞的 增殖较 PH7.4 环境明显降低，分别降低 90.1%和 44.3%，同时，这种酸中毒对细胞 增殖的影响没有时间依赖性。结论 TASK-1，-2，-3 双孔钾离子通道在人 MG63 细胞中表达，并定位于细 胞膜及细胞核周围；另外，TASK 通道可能与人骨肉瘤细胞的增殖有密切关系。