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青岛大扁藻光合作用过程对重金属cu2急性毒性胁迫的响应分析-生态学专业论文.pdf
独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其 他 人 已 经 发 表 或 撰 写 过 的 研 究 成 果 , 也 不 包 含 未 获 得(注:如没有其他需要特别声明的,本栏可空)或其他教育机构的学位或证书使 用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:签字日期:年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,并同意以下 事项:1、学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许 论文被查阅和借阅。2、学校可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以 采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学“中 国学术期刊(光盘版)电子杂志社”用于出版和编入 CNKI《中国知识资源总库》, 授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名:导师签字:签字日期: 年 月 日 签字日期: 年 月 日青岛大扁藻光合作用过程对重金属 Cu2+急性毒性胁迫的响应研究 摘要Cu2+是海洋微藻正常生长所必须的微量营养元素之一,但是过量的 Cu2+会对 其生长产生毒性作用。近年来的调查结果表明,我国近岸海域广泛受到 Cu2+污 染,由于 Cu2+具有毒性大、在海洋环境中难代谢、易被生物富集等特点,对海 洋生态系统的平衡与稳定威胁较大,Cu2+污染已成为环境热点问题而引起各方面 的广泛关注。目前有关 Cu2+对海洋微藻的毒性效应研究多集中于对其生长、种 群动态变化以及生理生化作用等方面,而聚焦于光合作用上的相关报道较少。海 洋微藻为海洋生态系统的初级生产者,光合作用为海洋微藻最重要的生理功能, 在驱动整个海洋生态系统的物质循环与能量流动方面起到极其重要的作用,研究 Cu2+对海洋微藻光合作用的影响具有重要的理论和实际指导意义。本文在实验生态条件下,以青岛沿岸常见的饵料微藻青岛大扁藻为目标生 物,利用活体叶绿素荧光法、流式细胞术、传统血球计数法、电子显微镜等方法 研究 Cu2+胁迫对青岛大扁藻的急性毒性效应。在此基础上,采用 PAM(Pulse Amplitude Modulation)和光谱分析技术分析探讨青岛大扁藻光合系统对 Cu2+急 性毒性胁迫的响应,并对可能的影响机制进行了初步探讨。主要结果如下:1. Cu2+对青岛大扁藻的急性毒性效应研究(1)Cu2+急性毒性胁迫能显著影 响青岛大扁藻的生长。48h 时低浓度(1.5、2.5 mg.L-1)Cu2+胁迫表现出毒物的“兴 奋效应”,随着胁迫浓度的增大和胁迫时间的延长,Cu2+对青岛大扁藻的种群增 长表现出明显的抑制效应。48h EC50 和 96h EC50 分别为 3.884 mg.L-1 和 3.957 mg.L-1,说明随着胁迫时间的延长,藻细胞提高了对胁迫的适应能力,抗性得到 增强;(2)Cu2+急性毒性胁迫能明显影响藻细胞的形态和运动情况。光学显微 镜下观察的结果显示随胁迫浓度加大,青岛大扁藻运动能力减弱,细胞形态发生 改变,细胞收缩变圆,细胞壁增厚,并出现细胞破损、内容物外溢等现象;透射 电镜结果显示随着胁迫浓度增大,细胞膜与细胞壁局部分离,质膜内陷,细胞壁和细胞膜都出现一定程度的溶解。上述结果表明青岛大扁藻生物膜系统对 Cu2+ 胁迫反应非常敏感,膜损伤是影响藻细胞分裂、繁殖, 抑制藻类生长的一主要原 因;(3)藻细胞数、Chl α 浓度和活体叶绿素荧光三者之间存在明显的线性相关 关系,且 Cu2+胁迫并没有改变这种关系。通过比较三者 96h EC50 可知对 Cu2+胁 迫的敏感性顺序为活体叶绿素荧光Chl a 含量种群密度。活体叶绿素荧光可用 来灵敏指示 Cu2+污染条件下微藻种群的动态变化。2. Cu2+急性毒性胁迫对青岛大扁藻光合色素的影响(1)随 Cu2+胁迫浓度增 大,3 种光合色素(Car, Chl a 和 Chl b)和总 Chl 含量均呈现减小趋势, 3 种光合色素对 Cu2+的敏感顺序由高及低依次为:Car Chl a Chl b;(2)Cu2+ 胁迫降低了光合色素含量,导致其吸收峰、荧光发射峰和荧光激发峰峰值降低;(3)Cu2+胁迫没有破坏色素分子之间的能量传递,Chl b、Car 吸收的光能可通 过 Chl a 传递到 PSII。但随着 Cu2+胁迫浓度升高,Chl b 主激发峰发生了“蓝移现 象”(em=650 nm)。3. Cu2+急性毒性胁迫对青岛大扁藻叶绿素荧光参数的影响(1)本实验条件 下,Cu2+胁
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