伤寒沙门菌质粒对dc成熟及其自噬过程和免疫功能的影响-病原生物学专业论文.docxVIP

伤寒沙门菌质粒对DC成熟及其自噬过程和免疫功能的影响中文摘要如第一部分建立体外感染模型，于感染后2h收集DC，分别进行细胞破膜活菌计数和AnnexinV-FITC/PI双染FCM检测，观察不同菌株侵袭DC的能力及对细胞凋亡的影响；②将实验菌株尾静脉感染小鼠，于不同时间段（1d、3d、5d和10d）处死小鼠，收获脾细胞悬液，FCM检测脾脏DC的数量及表面CD40、CD??、CD86和MHCⅡ的表达；脾脏DC胞内细胞因子TNF-?、IL-12和IFN??的分泌水平；脾脏T淋巴细胞亚群比例及细胞活化指标CD44和CD62L的表达情况；③平板菌落计数法检测感染后肝脏和脾脏内活菌数。实验结果发现：①感染2h，χ3337和χ3337/pRST98感染组DC内细菌数量无显著性差别（P0.05）；χ3337/pRST98感染组凋亡率显著高于χ3337感染组（P0.05）；②S.typhimurium感染后小鼠脾脏细胞总数在感染χ3337后3d、5d和10d明显增多（P0.01，P0.05，P0.01）；感染3d开始，DC绝对数量高于control组（P0.01）；DC绝对数量和百分比在感染5d（P0.01，P0.05）和10d（P均0.05）均高于control组；感染χ3337/pRST98后3d，脾细胞总数显著高于未感染组（P0.05）；感染5d，细胞总数、DC绝对数量和百分比均显著升高（P均0.05）；感染10d，脾细胞总数和DC绝对数量仍均显著高于control组（P均0.05）；χ3337感染组小鼠在感染后5d，CD11c+DC绝对数量以及相对数量都显著高于χ3337/pRST98感染组（P均0.05）；小鼠感染S.typhimurium后，CD40、CD??、CD86和MHCⅡ的表达量均显著增加；χ3337/pRST98感染组与χ3337感染组比较，CD11c+DC除了CD40的表达量无显著差异（P0.05），CD??、CD86和MHCⅡ的表达量均显著低于χ3337感染组（P0.05，P0.01，P0.05）；S.typhimurium感染后，小鼠脾脏CD11c+DC的TNF-?、IL-12和IFN??分泌量显著增加；χ3337/pRST98感染组小鼠脾脏CD11c+DC的IL-12和IFN??分泌量显著低于χ3337组（P均0.05），不同菌株感染组间TNF-?的分泌量无显著差异（P0.05）；③对照组小鼠、感染χ3337小鼠和感染χ3337/pRST98小鼠脾脏中CD3+CD4+Th细胞和CD3+CD8+Tc细胞在淋巴细胞中所占比例这两项指标均无差异（P0.05）；χ3337和χ3337/pRST98感染后10d淋巴细胞表面CD44表达量显著增高（P均0.05）；淋巴细胞CD62LlowT细胞群比例显著增加（P均0.05）；χ3337感染组小鼠在感染后10d，CD44high和CD62LlowT细胞比例都显著高于χ3337/pRST98感染组（P均0.05）；细菌感染第10d，两组小鼠肝脏和脾脏的活菌数均达到较高水平，χ3337组的肝脏、脾脏活菌数明显低于中文摘要伤寒沙门菌质粒对DC成熟及其自噬过程和免疫功能的影响χ3337/pRST98组（P均0.05）。结论1．伤寒沙门菌质粒pRST98对宿主菌侵袭DC的能力未见明显改变，但能抑制DC自噬，诱导凋亡，促进细菌在DC内的存活和增殖，从而加重细胞损伤。2．伤寒沙门菌质粒pRST98能影响DC分泌细胞因子的水平，抑制Th1型细胞因子IFN-γ和IL-12，促进Th2型细胞因子IL-10的表达，表明质粒pRST98具有转换不同免疫应答类型的能力，使宿主菌毒力增强实现免疫逃逸。3．携带pRST98质粒的沙门菌毒力株能通过抑制DC成熟，降低细胞提呈抗原的能力，干扰机体内效应性淋巴细胞的活化，导致脏器菌量增加，从而加重机体损伤并最终影响感染免疫的结局。关键词：沙门菌，质粒，树突状细胞，自噬，免疫功能研究生：韦莉导师：黄瑞伤寒沙门菌质粒对DC成熟及其自噬过程和免疫功能的影响英文摘要TheeffectsofSalmonellaplasmidonDCmaturation,autophagyandthedevelopmentofTcellimmunityAbstractTyphoid,alsoknownasentericfever,isanancientacutediarrhealdiseasescausedbySalmonellatyphi(S.typhi).Theepidemicofmulti-drugresistantS.typhiaffectedasmanyas13provincesandcitiesinChinainthemid-andlate1980‘s.Inasurveyofant