吡格列酮对糖尿病大鼠肝脏chemerin cmklr1及tnf--α mrna表达的影响-effect of pioglitazone on expression of chemir in cm klr1 and tnf - α mrna in liver of diabetic rats.docx

天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的：Chemerin是一个在肝脏、脂肪高表达的肝脏／脂肪细胞因子，与脂肪细胞分化、肥胖及代谢综合征有关，chemerin的受体cmklrl是一种G蛋白偶联受体，chemerin可通过结合表达cmklrl的未成熟树突细胞、巨噬细胞等发挥趋化作用，chemerin在代谢和免疫方面有双重作用。Chemerin在人体胰腺有较高表达，chemerin及其受体在小鼠胰岛B细胞均有表达。Chemerin可调节肝葡萄糖产生和肌肉葡萄糖摄取，chemerin在B细胞表达的调节依赖于机体代谢状态，局部分泌的chemerin能以自分泌／旁分泌的方式发挥其功能，D细胞可能是chemerin的一个直接作用靶点。离体胰岛和灌注胰腺研究可见chemerin(．／．)小鼠葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)受损，相I反，chemerin(+／+)d,鼠GSIS增强且糖耐量改善，提示chemerin以组织依赖的方式在糖稳态中起重要作用。db／db小鼠、STZ致糖尿病小鼠胰腺chemerinmRN．A及蛋白表达水平分别较其相应的正常对照小鼠明显下调。TNF．0【能通过多种机制参与胰岛素抵抗(IR)，上调脂肪细胞chemerinmRNA表达，是chemerin的潜在调节因子。噻唑烷二酮类药物(TZD)亦能上调脂肪细胞分化过程中chemerinmRNA表达，减轻IL一6对chemerinmRNA表达的抑制作用，因此chemerin可能是TZD提高胰岛素敏感性的靶基因。在代谢综合征患者，血chemerin水平与脂联素水平呈明显负相关，推测chemerin、脂联素在代谢综合征中发挥相反的作用。本研究旨在观察吡格列酮对糖尿病大鼠肝脏chemerin、cmklrl、TNF．0【mRNA表达及血清脂联素水平的影响。方法：雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组与吡格列酮组。尾静脉注射链脲佐菌素制作糖尿病大鼠模型，造模成功后吡格列酮组每天按15mg／kg经胃灌药，连续给药8周。第8周末处死大鼠留取肝脏组织、血液标本。采用实时定量PCR法检测大鼠肝脏chemerin、crnklrl及TNF．C【mRNA的表达水平。酶联免疫吸附(ELISA)法检测：长鼠血脂联素水平。结果：ChemerinmRNA在SD大鼠肝脏有较高的表达，本研究采用real．timePCR检测显示，在正常对照组、糖尿病组与吡格列酮组大鼠肝脏，chemerin基因的表达均强于作为内参基因的13-actin。SD大鼠肝脏表达chemerin的受体cmklrl，糖尿病组肝脏chemerinmRN．凸。表达低于正常对照组，而吡格列酮组肝脏chemerin天津医科大学硕士学位论文mRNA表达高于糖尿病组，差异均有统计学意义(均尸0．017)。正常对照组、糖尿病组与吡格列酮组大鼠间肝脏cmklrlmRNA表达差异无统计学意义。糖尿病组肝脏TNF．c【mRNA表达较正常对照组升高(尸O．017)，吡格列酮组较糖尿病组降低，但差异无统计学意义。吡格列酮组、糖尿病组较正常对照组血清脂联素水平均下降，吡格列酮组较糖尿病组升高，差异均有统计学意义(P0．05)。结论：糖尿病大鼠肝脏TNF．amRNA表达增高，吡格列酮可能通过上调chemerinmRNA的表达而改善肝脏的胰岛素敏感性，3组大鼠肝脏cmklrlmRNA表达水平未呈现明显差异。Chemerin可能是噻唑烷二酮类药物改善胰岛素敏感性的一个靶基因，噻唑烷二酮类药物减轻肝脏胰岛素抵抗和炎症损伤的作用可能与其抑制肝脏TNF．c【表达有关。毗格列酮可升高糖尿病大鼠血浆脂联素水平。关键词：chemerincmkM噻唑烷二酮类糖尿病，实验性肝肿瘤坏死因子0【脂联素大鼠，Sprague．Dawley实时定量聚合酶链反应IIAbstractObjective：Chemerinisarecemlydiscoveredheptoadipokinethathighlyexp∞ssedalldinadiposetissueandliver，chemerinhasdualrolesinmetabolicsyndromeinnammation，andisaligandoftheG-coupledreceptorcrnklr1．Chemerincouldblndrecruitmenttocmklrlonimmaturedendriticcellsandmacrophagesleadingtotheirtol哪Dhoidorgansandsitesofinjury．Chemerinwasstronglyexpressedmtheh啪anpancreas，chemerinanditsreceptorweredetectedinthe[3-cellsoftheisltesinmi