吡喹酮及噁二唑类衍生物抗日本血吸虫作用的初步分析-preliminary analysis of praziquantel and oxadiazole derivatives against schistosoma japonicum.docx

中英文词汇对照表英文缩写英文全名中文全名Ampampicillin氨卞青霉素CLSMconfocollaserscanningmicroscopy激光共聚焦扫描显微镜CMCCarboxymethylcellulose羧甲基纤维素钠DMFDimethylFormamide二甲基甲酰胺DMSOdimethylsulfoxide二甲基亚砜FBSFetalBovineSerum胎牛血清Formalin-alcohol-aceticacidfixedfluidFAA福尔马林-酒精-醋酸固定液GRglutathionereductase谷胱甘肽还原酶HEPES4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonicacid4-羟乙基哌嗪乙磺酸NMRnuclearmagneticresonance核磁共振PBSphosphatebuffersaline磷酸盐缓冲液PZQPraziquantel吡喹酮SARstructureactivityrelationship构效关系SMStartingMaterial起始物料TGRthioredoxinglutathionereductase硫氧还蛋白谷胱甘肽还原酶TrxRthioredoxinreductase硫氧还蛋白还原酶TEAtriethylamine三乙胺吡喹酮及噁二唑类衍生物抗日本血吸虫作用的初步研究中文摘要吡喹酮作为一种高效低毒的口服广谱抗寄生虫药，是世界卫生组织推荐的血吸虫病原学治疗的首选药物。吡喹酮的成功研制及现场广泛有效应用，对有效控制与降低全球血吸虫病疫情发挥了巨大作用。但吡喹酮仅对成虫有效，而对发育期童虫无杀伤作用，因此吡喹酮无预防血吸虫病的作用。另外，在流行区现场反复使用吡喹酮进行大规模群体化疗，这样有可能导致血吸虫对该药产生抗性而使吡喹酮的治疗效果降低。实验室研究已经证实了曼氏血吸虫在吡喹酮药物压力下可产生抗药性。随后，在非洲一些曼氏血吸虫病重度流行区相继报告吡喹酮药效下降，并在流行区病人体内分离到曼氏血吸虫吡喹酮抗性现场株。目前亦见报道在实验室诱导条件下日本血吸虫对吡喹酮产生部分抗性。因此，开展抗血吸虫新药的研究以及寻找新的治疗途径已成为当前血防研究中重要课题。本实验以吡喹酮和噁二唑的基本结构为基础，改造合成其衍生物，在体外试验和体内试验初步筛选各化合物的抗日本血吸虫作用。【目的】以吡喹酮与肉桂醇的基本结构为基础，经改造合成不同的化合物，并通过体外实验和动物体内实验验证其对日本血吸虫成虫的杀灭作用。【方法】以吡喹酮和肉桂醇的基本结构为基础，合成其衍生物，包括吡喹酮衍生物PZQ1、PZQ2和PZQ3以及噁二唑类衍生物ODZ1和ODZ2，设计体外试验和小鼠体内试验检验各化合物的杀血吸虫效果。体外实验阳性钉螺常规逸尾蚴经腹部皮肤感染昆明小鼠，感染6周后无菌条件下剖杀，肝门静脉内取成虫，体外培养并加药物和化合物，设DMSO溶剂对照组；PZQ及5种化合物分别设低剂量组（50μmol/L）、中剂量组（100μmol/L）和高剂量组（200μmol/L）。通过观察虫体活力、体表损伤程度和死亡率等来评价新化合物对日本血吸虫的直接杀伤作用效果。体内试验，阳性钉螺常规逸尾蚴经腹部皮肤感染BALB/c小鼠，感染后6周，上述所有药物及新化合物均经口灌胃给药治疗1次，剂量为300mg/kg。治疗2周后，剖杀小鼠，肝门静脉和肠系膜静脉检虫，计算减虫率。【结果】体外实验结果显示：除噁二唑衍生物ODZ2外，均具有一定的致血吸虫体表损伤作用，其中以吡喹酮衍生物PZQ1作用最强，该化合物50μmol/L剂量组培养72小时死亡率为60%，PZQ对应剂量死亡率为55%，未死亡的日本血吸虫的活动基本被完全抑制，评分为0；100μmol/L剂量组72小时死亡率为100%；200μmol/L剂量组24小时死亡率即达100%，具有很好的体外杀虫作用，其杀虫效果与PZQ相近，两者差异无统计学意义（P﹥0.05）；噁二唑化合物ODZ1组100μmol/L剂量组72小时死亡率达90%，200μmol/L组剂量24小时死亡率即达100%。吡喹酮衍生物PZQ2、PZQ3和噁二唑化合物ODZ2100μmol/L剂量组72小时死亡率分别为75%、60%和30%；200μmol/L剂量组72小时死亡率分别为100%、80%和45%，体内实验结果显示：PZQ、PZQ1、PZQ2、PZQ3、ODZ1和ODZ2组的减虫率分别为98.2％、95.9％、31.8％、48.6％、45.5%和38.6％。吡喹酮衍生物PZQ1效果最好，减虫率达95.9％，与吡喹酮治疗组效果相当（P﹥0.05）。其余新合成的化合物体内杀虫效果不如吡喹酮（P均0.05）。【结论】吡喹酮衍生物PZQ1在体外实验和和体内实验均有与吡喹酮相当的