扁平苔藓皮损中mif mmp-9的表达及意义-expression and significance of mif mmp - 9 in lichen planus lesions.docxVIP

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  • 2018-06-28 发布于上海
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扁平苔藓皮损中mif mmp-9的表达及意义-expression and significance of mif mmp - 9 in lichen planus lesions.docx

扁平苔藓皮损中mif mmp-9的表达及意义-expression and significance of mif mmp - 9 in lichen planus lesions

学位论文独创性声明本人声明,所呈交的学位论文系在导师指导下本人独立完成的研究成果。文中任何引 用他人的成果,均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的 任何形式的研究成果,也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我一同工作的 同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本文如违反上述声明,愿意承担以下责任和后果:1、 交回学校授予的学位证书;2、 学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报;3、本文按照学校规定的方式,对因不当取得学位给学校造成的名誉损害,进行公开道歉。4、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名:日期:年月日学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家 有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山西医科 大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印 或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时,署名单位 仍然为山西医科大学。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名:日期:年月日 指导教师签名:日期:年月日(本声明的版权归山西医科大学所有,未经许可,任何单位及任何个人不得擅自使用)前言扁平苔藓(Lichen planus,LP)是一种慢性复发性炎症性皮肤病,皮损多表现为多角 形扁平紫红色丘疹,常伴剧烈瘙痒,且侵及口腔黏膜。其病因及发病机制至今尚无定论, 免疫、遗传、感染、药物等均可为其发病因素。近年来多数学者研究认为其发病主要是T 细胞介导的细胞免疫反应,即某些抗原通过一系列途径激活T细胞,T细胞活化后分泌的某 些细胞因子之间相互作用,进一步吸引T细胞浸润,如此循环最终引起扁平苔藓的一系列 临床病理表现。扁平苔藓典型的组织病理学特点为:基底细胞液化变性,基底膜带遭到损坏。基底 膜带是连接表皮与真皮的特殊结构,主要成分为Ⅳ型胶原和层黏连蛋白(laminin ,LN)。 由于基底膜带能够给角质形成细胞提供一个生存信号以防止其发生凋亡[1]。所以,当基底 膜带发生损伤时,角质形成细胞就会发生凋亡,凋亡的角质形成细胞无法合成基底膜带的 成分Ⅳ型胶原和层黏连蛋白,使其进一步遭到破坏。基质金属蛋白酶(Matraix Metalloproteinases,MMPs)家族是一组锌、钙依赖性内 肽酶。它的主要功能是降解细胞外基质。MMP-9属于这个家族中的明胶酶类,多来源于活 化的T淋巴细胞和巨噬细胞。由于它可降解基底膜带主要成分IV 型胶原和层黏连蛋白,所 以在扁平苔藓发病中可能发挥重大的作用。国内有研究证实MMP - 9 在扁平苔藓基底膜带 降解中发挥了作用[2]。而它的激活机制则成为近几年研究的热点。巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是由激活的T淋巴 细胞和巨噬细胞分泌的一种淋巴细胞因子。近年来对其在炎症及免疫反应中所发挥的作用 有了新的认识。研究发现MIF在免疫介导、细胞增殖和分化中也起着重要作用[3][4]。而且 MIF可以在几乎全身组织细胞中表达产生,包括皮肤表皮细胞。它还与多种炎症性、自身 免疫性疾病有关。另外,研究已证实在大鼠骨母细胞中MIF能诱导MMP-9的表达上调[5]。 而MMP-9的活化有赖于一些细胞因子或生长因子与其上游启动子区域的转录因子相结合 而发挥作用。所以,在扁平苔藓中,MIF可能通过某种途径上调了MMP-9的表达,从而造 成基底膜带的破坏。本研究采用免疫组织化学方法和RT-PCR法观察并检测了MIF、MMP-9的蛋白及它们的 mRNA在扁平苔藓组织中的表达及分布情况,并进行对照比较,以进一步探讨两者在扁平 苔藓发病过程中的作用及意义。材料及方法1. 材料1.1材料来源病例组标本 30 例均系 2008-2009 年在山西医科大学第一医院皮肤科门诊就诊,经临床和病理诊断确诊的扁平苔藓患者。男性 17 例,女性 13 例,年龄 20–64 岁,平均 41.9 岁。所有患者在半年内均未使用过糖皮质激素和免疫抑制剂治疗。于患者四肢及躯干典型 皮损处取材。对照组标本 30 例均来自我院整形科、普外科所取的正常皮肤组织,男 20 例,女 10 例,年龄 18–60 岁,平均年龄 37.6 岁。病例组与对照组年龄、性别差异无统计学 意义(p>0.05)。所有标本取材后立即分为两份,一份经中性福尔马林液浸泡固定,石 蜡包埋后保存待用于免疫组化染色;另一份予以液氮迅速冷冻后转入-80℃冰箱保存,备 用作 RT-PCR 实验。1.2 试剂与仪器兔抗人MIF多克隆抗体 (浓缩液):为美国Santa Cruz公司

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