比索洛尔对动脉粥样硬化大鼠血no及血管mmp9,vegf表达的影响-effects of bisoprolol on the expression of no, m mp9 and vegf in blood of atherosclerotic rats.docxVIP

比索洛尔对动脉粥样硬化大鼠血NO及血管VEGF，MMP9表达的影响摘要目的：本实验目的是观察比索洛尔是否对动脉粥样硬化有防治作尔，观察比索洛尔对动脉粥样硬化大鼠血NO及血管MMP9，VEGF表达的影响。方法：1.选取50只6周龄雄性wister大鼠，体重约180±40g，随机分为⑴A组（空白对照组）：给予普通饲料；⑵B组（模型组即动脉粥样硬化组）：给予高脂饲料（含猪油10%，丙硫氧嘧啶0.2%，白糖7%，胆固醇2%，胆酸钠0.5%及普通饲料80.3%），并每间隔一个月分三天腹腔注射总量为60万u/kg的VitD注射液。⑶C组（比索洛尔干预组1）：给予高脂饲料，及每天灌胃比索洛尔1.25mg/kg/只，同样并每间隔一个月分三天腹腔注射总量为60万u/kg的VitD注射液。⑷D组（比索洛尔干预组2）：给予高脂饲料，及每天灌胃比索洛尔2.5mg/kg/只，同样每间隔一个月分三天腹腔注射总量为60万u/kg的VitD注射液。(5)E组（比索洛尔干预组3）：给予高脂饲料，并每天灌胃比索洛尔5mg/kg/只，同样每间隔一个月分三天腹腔注射总量为60万u/kg的VitD注射液。2.于13周末先将大鼠麻醉，后抽取大鼠心腔内血液4ml，将血液注入含0.5%枸橼酸钠的检测管中，将装有血液的检测管放入离心机中，以2000r/min的速度离心后，取上清液测定血清NO及NO合酶。3将大鼠主动脉从主动脉开口处分离至腹主动脉分支处，并将分离出的主动脉从主动脉弓与胸主动脉分界处分为两份。将主动脉弓段血管壁的脂肪及筋膜用镊子分离掉，洗净后做石蜡包埋固定，用固定好的石蜡块切成4um厚度的薄片然后行HE染色及免疫组化MMP9及VEGF。6.统计方法：用统计学软件SPSS17.0完成实验结果的统计工作，实验结果采用均数加减标准差(X±S)表示，若方差齐,可进行单因素方差分析,LSD法进行组间均数两两比较。结果：1.病理切片可见:A组:动脉血管内膜光滑完整，各层结构清晰，未见泡沫细胞；B组：表层可见纤维帽，表面纤维增生紊乱，管壁向管腔明显突出，其下可见大量泡沫细胞形成，深层可见一些脂质沉积；C组：管壁表层仍可见纤维帽并向官腔突出，其下可见多量泡沫细胞及脂质和坏死物质沉积，内皮不完整；D组：表层纤维帽较薄，管壁向管腔突出不明显，其下可见泡沫细胞及脂质。E组：与D组相比较，程度明显减轻，可见内皮稍不完整及少量泡沫细胞。2.各组血清NO含量：A组：31.656±5.158，B组：8.608±2.294，C组：10.032±2.133，D组：15.988±2.393，E组：23.314±4.274。B组与A组相比P0.05,C组与B组无明显统计学差异，P0.05，D组和E组与B组相比，P值均小于0.05，D组和E组相比较有统计学意义P0.05。3.各组血清NOS含量：A组:17.994±0.842,B组：10.263±1.306,C组：10.689±1.387,D组：13.464±0.921，E组：16.105±0.946。B组与A组相比P0.05,C组与B组无明显统计学差异，P0.05，D组和E组与B组相比，P值均小于0.05，D组和E组相比较有统计学意义P0.05。4.各组血管VEGF的平均光密度值：A组：14.526±4.725，B组：167.699±25.745，C组：161.708±30.081，D组：100.777±19.453，E组：56.857±27.685。B组与A组相比P0.05,C组与B组无明显统计学差异，P0.05，D组和E组与B组相比，P值均小于0.05，D组和E组相比较有统计学意义P0.05。5.各组血管MMP9的平均光密度值：A组：11.936±5.045，B组：137.577±32.548，C组：123.562±27.071，D组：83.691±20.233，E组：46.510±18.087。B组与A组相比P0.05,C组与B组无明显统计学差异，P0.05，D组和E组与B组相比，P值均小于0.05，D组和E组相比较有统计学意义P0.05。结论：1.通过给予大鼠高脂饲料及定时定量给予腹腔注射VitD可成功复制大鼠动脉粥样硬化模型。2.本实验中可见大鼠血NO及NO合酶在动脉粥样硬化模型组中明显降低，表明内皮功能障碍参与了动脉粥样硬化发生发展。3.MMP9在动脉粥样硬化模型大鼠主动脉组织中明显升高，表明细胞外基质降解与动脉粥样硬化及斑块不稳定有密切关系。4.VEGF在动脉粥样硬化模型大鼠主动脉组织中明显升高，提示动脉粥样硬化的形成与血管内皮细胞过度增生有关。5.比索洛尔干预后，血NO及NO合酶明显升高，组织内VEGF及MMP9明显下降，表明比索洛尔能改善粥样硬化血管的血管内皮功能，防治内皮增生，减少细胞外基质的降解，进而发挥抗AS的作用。关键词：比索