白芷中欧前胡素提取分离及主要药效学分析-extraction and separation of imperatorin from angelica dahurica and analysis of its main pharmacodynamics.docxVIP

中文摘要中药白芷是常用中药之一，具有解表、祛风燥湿、消肿排脓等功效。本课题对白芷中欧前胡素进行了提取分离纯化，并对其进行了药理学研究。本课题对欧前胡素的提取分离条件进行了优化，完善了提取分离纯化欧前胡素的方法，最终得到IMP样品7.43g。经质谱等方法鉴定为欧前胡素，经含量测定确定欧前胡素含量90%。经急性毒性实验确定了欧前胡素LD50值和最大耐受量，以最大耐受量为依据，确定了药动学和药效学研究的剂量。首次建立了欧前胡素的HPLC-MS/MS含量检测方法，并以此进行了欧前胡素的药动学研究，计算了欧前胡素的主要药动学参数；欧前胡素主要药动学特征为：二室模型，一级动力学消除，大鼠体内动力学过程属于线性药物动力学。药效学研究中，进行了抗炎作用、镇痛作用、镇静抗惊厥作用和对血流变、血小板聚集、凝血功能影响的实验研究。首次进行了欧前胡素抗炎作用实验研究。通过耳肿胀法、足肿胀法和腹腔毛细血管亢进法以及选用急性胸膜炎模型进行研究，证实IMP有一定抗炎作用，作用机理与抑制炎性组织中的PGE2和TNF-α含量升高有关。首次对欧前胡素的镇痛作用进行了研究。结果显示，扭体法证实IMP有一定的镇痛作用；热板法提示IMP无镇痛作用；压痛法证实IMP仅能使致炎足的痛阈值提高。结果表明，欧前胡素的镇痛作用可能是末梢性镇痛。对伤害性疼痛模型外周血中单胺含量影响的试验表明，IMP有降低外周血中NE、DA、5-HT的含量的的作用，提示欧前胡素的镇痛机理可能与影响外周的致痛因子，如单胺类物质等有关。镇静抗惊厥试验中，通过IMP对戊巴比妥阈下催眠的影响和以戊四氮致惊厥CD50的影响，初步证实IMP有镇静和抗惊厥作用，提示欧前胡素对中枢神经可能有抑制作用。对脑内单胺的影响表明，IMP可降低NE、DA、5-HT含量，提示欧前胡素的作用机理可能与此有一定联系。对血流变、血小板聚集、凝血功能影响的实验研究结果提示，IMP对血液粘度增高有改善作用，提示欧前胡素有降低血液粘度的作用；IMP对ADP和凝血酶诱导的血小板聚集均有抑制作用，提示欧前胡素对血小板聚集和血小板释放功能具有抑制作用；IMP对PT、APTT、Fbg、TT均无显著性影响，提示欧前胡素对凝血功能无影响。综上，欧前胡素具有与白芷主要功效及应用相关的药理活性，是中药白芷的效应物质之一。关键词：白芷欧前胡素分离药动学药效学ABSTRACTDuhuricaAngelicaRootisonekindofcommon-usedChineseherbwiththefunctionsofrelievingexteriorsyndrome,expellingwind,removingdampness,subduingswelling,promotingpusdischarge,etc.Imperatorinisisolatedfromitandisevaluatedbyaseriesofpharmacologicaltests.Thetechniquesofisolatingimperatorinareoptimizedandthecompound,weighing7.43g,isgot.Itwasidentifiedbymeansofspectralandliteraturedataandtherateofitspurityisabove90%,demonstratedbythecontentassaying.TheacutetoxicologicalevaluationindicatedthevalueofLD50andmaximumtolerateddose.Arapidandsensitiveassayforthequantificationofimperatorininserumhasbeendeveloped,performedbyHPLC-MS/MS.Withthismethod,theresearchonthepharmacokineticparametersofimperatorinwascarriedonandthemainpharmacokineticscharacterswereindicated,suchaslinearpharmacokinetics,first-orderkineticsandtwo-compartmentmodel.Theresultsofanti-inflammatorytestsdemonstratedimperatorin’seffectofreducinginflammation.theresultsalsoindicatedthemechanismofthiseffectisthatimperatorindecreasesthecontentofinflammatoryfa