骨髓间充质干细胞调节树突状细胞治疗再生障碍性贫血的免疫机制研究-immune mechanism of bone marrow mesenchymal stem cells regulating dendritic cells in treating aplastic anemia.docxVIP

下载本文档

5
0
约4.54万字
约 56页
2018-07-05 发布于上海
举报
版权申诉

骨髓间充质干细胞调节树突状细胞治疗再生障碍性贫血的免疫机制研究-immune mechanism of bone marrow mesenchymal stem cells regulating dendritic cells in treating aplastic anemia.docx

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

骨髓间充质干细胞调节树突状细胞治疗再生障碍性贫血的免疫机制研究-immune mechanism of bone marrow mesenchymal stem cells regulating dendritic cells in treating aplastic anemia

广州医学院硕士学位论文广州医学院硕士学位论文 PAGE PAGE 5研究内容：（1）将正常人骨髓的 MSC 与 AA 患者的 T 细胞共培养，流式细胞仪检测共培养前后的 T 细胞表面抗原和 T 细胞亚群的变化，以及免疫相关的细胞因子 IL-2，IL-4，IL-10，IFN-γ 在培养前后表达的变化（ELISA 法），研究 MSC 对 AA 患者的 T 细胞活化和增殖的影响。(2)从正常人外周血单个核细胞诱导 DCs，将未成熟 DCs 在脂多糖（LPS）刺激下与正常人骨髓的 MSC 共培养，检测有或无 MSC 共培养前后，流式细胞仪检测 DCs 表面抗原和共刺激分子 CD80 和成熟标记物抗原 CD83 的表达，研究 MSC 对 DCs 发育的影响。(3)将正常人外周血单个核细胞诱导 DCs，在 LPS 的刺激下获成熟 DCs 后与正常人骨髓的 MSC 与共培养，DCs 表面抗原和共刺激分子 CD80 和成熟标记物抗原 CD83 的表达（流式细胞仪），研究 MSC 对成熟 DCs 的影响。研究方法：(l)体外分离培养正常人的 MSC，观察细胞形态，同时用流式细胞仪检测其分子表面抗原 CDl05，CD29，CD34，CD44，HLA-DR。(2)提取 20 例再障患者（未经抗胸腺球蛋白等免疫治疗）的外周血单个核细胞，用 T 淋巴细胞尼龙毛柱分离法提取 T 淋巴细胞。用流式细胞仪进行 T 细胞表面抗原和 T 细胞亚群的检测鉴定。（3）取健康人外周血，分离单个核细胞，在重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和重组人白介素-4（IL-4）的培养条件下制备 DCs。在 LPS 诱导下获得成熟树突细胞，用流式细胞仪进行 DCs 成熟前后的表型鉴定。（4）用正常人骨髓 MSC 与再障患者来源的 T 细胞共培养，流式细胞仪检测 T 细胞亚群的变化，以及与免疫相关的细胞因子 IL-2，IL-4、IFN-γ、IL-10 的蛋白水平在共培养前后的表达 (ELISA 法)。(5) 从正常人外周血单个核细胞诱导 DCs，将未成熟 DCs 在 LPS 刺激下与正常人骨髓的 MSC 共培养，流式细胞仪检测有或无 MSC 共培养前后，DCs 表面抗原 CD1a、共刺激分子 CD80 和成熟标记物抗原 CD83 的表达。（6）将正常人外周血单个核细胞诱导 DCs，在 LPS 的刺激下获成熟 DCs 后与正常人骨髓的 MSC 与共培养，在显微镜下观察细胞形态的变化，流式细胞仪检测 DCs 表面抗原 CD1a 和共刺激分子 CD80 和成熟标记物抗原 CD83 的表达。研究结果：（1）正常骨髓间充质干细胞与 AA 外周血 T 淋巴细胞共培养后，流式细胞仪检测 T 细胞的 CD8+细胞比例由（38.65 士 1.89）%下降为（29.69 士 1.62）%， CD4+细胞比例由（24.89 士 1.35）%上升至（34.89 士 1.89）%，差异具有统计学意义（P0.05）；ELISA 检测 IL-2 蛋白水平由(38.89 士 4.36) ng/L 下降为（6.8 士 2.12） ng/L；IFN-γ 由（38.46 士 1.64）ng/L 下降为（6.62 士 1.78）ng/L；IL-4 由(2.8 士 0.86) ng/L 上升为（5.32 士 1.68）ng/L；IL-10 由（2.87 士 1.12）ng/L 上升至（8.28 士 1.42）ng/L，差异均具有统计学意义（P0.05）。（2）未成熟的 DCs 在 LPS 的刺激下诱导后，流式细胞仪检测正常诱导组 DCs 细胞表面 CD1a 的表达升高，由诱导前的（2.4 士 1.2）%上调至（68.4 士 12.3）%，而 CD14+的表达由诱导前的（83.6 士 1.4）%下调至（3.5 士 1.2）% ，CD83 由（58.7 士 3.6）%上调至（72.4 士 10.6）%，CD80 由（41.2 士 3.8）%上调至（50.6 士 6.2）%；而与 MSC 共培养组， CD1a 表达率为（4.4 士 1.5）%，CD14+的表达仍保持较高的水平为（82.3 士 1.6）%，CD83 表达为（60.8 士 12.2）%，CD80 表达为（42.2 士 2.4）%，与 LPS 诱导前比较，差异无统计学意义（P0.05）。（3）成熟 DCs 与 MSC 共培养后，CD14+由（5.8 士 2.0）%上调至(62.8 士 1.6)%，CD1a 的表达率（48.6 士 4.2）%下调至（30.7 士 7.8）%， CD83 由（60.8 士 12.2）%下调至（40.9 士 6.2）%，CD80 由（50.2 士 4.8）%下调至（20.3 士 2.6）%，差异