疏肝健脾祛湿方对非酒精性脂肪肝实验研究.docVIP

疏肝健脾祛湿方对非酒精性脂肪肝实验研究 　　摘要：目的 观察疏肝健脾祛湿方对非酒精性脂肪肝模型的影响。方法 雄性Wistar大鼠60只随机分为三组（每组20只）：正常组喂养饲料用普通型，对于治疗组和模型组则采用高脂饲料来进行喂养。开始试验后，治疗组要给予疏肝健脾祛湿方灌胃，与此同时用等量的饮用水来对正常组以及模型组来灌胃，最后在第8w末来将各组大鼠处死。HE染色观察肝脏病理组织学改变， 测定肝组织胆固醇（TC）、甘油三酯（TG） 、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、血栓素B2（TXB2）和6-酮-前列腺素F1α（6-Keto-PGFlα）含量及TXB2/6-Keto-PGFlα（T/PG 比值）。结果 治疗组老鼠肝脏的脂肪变性问题得到了有效改善，HDL-C和6-Keto-PGFlα含量显著高于模型组；TC、TG、LDL-C、TXB2和TXB2/6-Keto-PGFlα 比值明显低于模型组。结论 疏肝健脾祛湿方能有效的改善肝脏脂肪变性问题，使HDL-C和6-Keto-PGFla含量升高，使TXB2/6-Keto-PGFlα比值以及TC、TXB2、TG、LDL-C含量明显降低，这很有可能就是抗非酒精性脂肪肝的作用原理。 　　关键词：疏肝健脾祛湿方；脂质；非酒精性脂肪肝；血栓素B2；6-酮-前列腺素F1α 　　非酒精性脂肪肝指的是一些没有过度饮酒经历的患者的肝细胞由脂肪变性继续恶化引发炎症并且纤维化的疾病。一些研究指出，当肝脏中的炎症程度的加深，会引发前列环素的减少和血栓素）的增多，导致肝细胞一些功能性障碍。此外由于饮食中的脂肪含量过高会使得体内的脂肪代谢出现问题，从而大量堆积到肝脏进而形成脂肪肝。本实验以大鼠为研究对象，通过对大鼠体内肝组织中的6-酮-前列腺素、F1α血栓素以及脂质的含量的测定，并用疏肝健脾祛湿方治疗，来为读者提供可参考的论据。 　　1 资料与方法 　　1.1一般资料 　　1.1.1动物 雄性Wistar大鼠60只，体重180～220g。 　　1.1.2试剂与仪器 胆固醇（TC） 、甘油三酯（TG） 试剂盒；高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）试剂盒；血栓素B2（TXB2）和6-酮-前列腺素F1α（6-Keto-PGFlα）放免试剂盒；全自动生化分析仪（Olympus Aul00O）；γ放射免疫计数器；离心机。 　　1.1.3 药物 疏肝健脾祛湿方（主要由苍术、白术、厚朴、茯苓、陈皮、木香、莪术等组成）。 　　1.2方法 　　1.2.1分组 大鼠正常喂养1w后，按体重层次随机分为三组，每组各20只，相应组别为：正常组、模型组、治疗组。 　　1.2.2动物模型制备和药物剂量 正常组喂普通饲料，模型组和治疗组喂高脂饲料（85%普通饲料加2%胆固醇和13%的猪油）。实验动物自由饮水，分笼饲养于18℃～22℃的动物实验室内。每天早8：00～晚20：00为采光时间，早8：00～9：00，下午15：00～16：00喂食、给药。实验开始后，治疗组以疏肝健脾祛湿方灌胃，2次/d，每周根据鼠重调整药物剂量；正常组以及模型组通过等量的饮用水来灌胃，2次/d。持续12w。 　　1.2.3肝脏观察 肝脏石蜡切片，HE染色，利用光镜观察大鼠肝脏的脂肪改变程度并同时来估计炎症的程度。肝细胞的脂肪变性的程度评判标准是，脂滴肝细胞占肝细胞总数1/3为（+），1/3-2/3为（++），大于2/3为（+++），几乎均呈脂滴肝细胞为（++++）。炎症的程度计分：按碎屑坏死、桥接坏死、汇管区炎症及小叶内炎症这四项指标，再根据炎症程度分别计为1、2、3、4分，考虑到BN、PN的严重度与病变活动度有一定的联系，在计分时采取加倍。 　　1.2.4标本的采集以及测定方法 12w后全部处死大鼠，取出其肝脏置于4℃生理盐水中反复漂洗，并通过研磨制得匀浆，离心10min后取上层组织液，在全自动生化分析仪上测定肝匀浆TC、TG、HDL-C和LDL-C；按6-Keto-PGF1α和TXB2放射免疫分析测定盒相关的操作步骤来测量6-Keto-PGF1α和TXB2的含量。 　　1.3统计方法 计量相关资料用 （x±s）表示，组与组之间的比较用t检验，等级相关资料通过秩和检验。采用SPSS13.0统计软件包来有效处理。P 　　3 分析 　　非酒精性脂肪肝始为肝细胞脂肪变性，发展到炎症，甚至进一步可恶化为肝硬化，最终导致肝功能急剧衰竭并引发肝癌。其病理相关生化基础是在氧应激和脂质过氧化反应的基础上诱导肝脏发生的炎症反应。当前研究表明，非酒精性的脂肪肝的病例在逐年上升，且逐渐蔓延到低年龄人群。为此，它的防治已成为目前医学界重点关注的问题。 　　TXB2以及6-K-PGF1a是体内重要的微循环调节体系，分别是血栓素A