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病理技术在先天性巨结肠诊断中应用进展分析 　　摘要：目的：研究病理技术在诊断先天性巨结肠患者的临床表现，探究诊断方法和诊断结果并进行深入的分析。 　　方法：对我院2012年1月至2013年1月参与活检的25例标本进行抽样，均疑似患有先天性巨结肠病症，通过对其下层远端粘膜以及肠管进行的HE染色筛查，所用分析方法为S-100蛋白、Cathepsin D以及PGP9.5。 　　结果：对25例疑似患有先天性巨结肠病症的标本进行检测可知：结肠粘膜（近端）中，可发现较多神经节细胞，而在结肠粘膜（远端）中，可发现24例缺如，出现神经节细胞的共有3例。 　　结论：采用适当的病理技术，对先天性巨结肠标本进行诊断，能够有效探明特征性，将上述三种方法进行交叉运用，能够互补其优势，值得临床推广使用。 　　关键词：病理技术使用 巨结肠诊断 应用 　　Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.08.068 　　【中图分类号】R-0 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2013）08-0072-01 　　Hirschsprung Disease，即先天性巨结肠病症（HD），该病症属于消化道疾病，是儿童的常见病。一般而言，从病理诊断的基础上来看，肠壁会产生病变，引发肌间神经丛中的细胞缺如，同时还伴有神经纤维病变以及扩张等现象。若对患儿进行病理技术诊断，很容易判断其病因，但是儿童的神经节尚有缺陷，生长结构并不完整，那么就需要用到更加有效的临床诊断方式。本文就根据三种检测方法，对诊断患儿相关疾病进行研究，做出如下报告。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料。本组选择我院2012年1月至2013年1月参与活检的25例标本进行抽样，均疑似患有先天性巨结肠病症，所有患儿中，有男性患儿共20例，女性患儿共5例；年龄在25天-6岁之间，平均年龄为15.44个月。 　　1.2 一般方法。对所有患儿进行样本取材，25例患儿均有疑似先天性巨结肠病症，而在检测中，术式影响较大，那么无法在标本的较远端显示肌层，所以可知应该取肠管道在粘膜的远端进行切片，用石蜡包埋，进而对HE染色筛选免疫组化对象。 　　将免疫组化进行染色所采用的方法为：第一，使用PGP9.5试剂，其试剂的配比为1∶40；第二，采用Cathepsin D抗体，其配比为1∶500；第三，使用S-100蛋白抗体，其配比为1∶200。最后综合染色结果并分析总结。 　　1.3 诊断判定。通过上述诊断可知，PGP9.5以及Cathepsin D染色后，颗粒变为深褐色，而S-100并未出现在神经节细胞中，若细胞状阴影为空白，那么可断定其为阳性；PGP9.5呈阳性，可知其定位在细胞核以及细胞浆中；而Cathepsin D呈阳性的断定标准为神经细胞浆内出现染色定位现象。 　　2 结果 　　2.1 对先天性巨结肠标本中的标志物进行诊断后，结果如表1所示。 　　通过上表可知，PGP9.5能够充分表达三项因素，但是在神经胶质中无法表达，具有明显的特异性；而Cathepsin D在神经节细胞中无法达到完全的阳性表现；S-100无法在神经节细胞中表达，其主要特征为空白。 　　3 结论 　　儿外科中较为常见的一种消化道疾病就是先天性巨结肠，临床上常常使用HE染色的组织学检查、诊断手段进行该病的病理诊断，该种病理诊断技术操作极为简洁、方便，诊断准确率高。目前，随着医疗科技的不断发展，人们对先天性巨结肠的了解和相关病原的起因也随之加深，治疗手段和相关的诊断方式也在不断进步，这也大大促进了病理诊断技术的提高，该病的诊断率也随之有所上升。 　　通过使用改良后的经肛脱出术进行取样，其送检病变肠管一般都为远端粘膜下层肠道，该部位的肠道缺乏浆肌层，且在相关粘膜进行活检时，均能发现这些受检标本为相关部位粘膜的下层组织。一般来说，粘膜组织下的神经丛比较稀疏，神经解细胞的数目和体积均比较小，因此在镜检的过程就常常需要区分和鉴别神经丛以及相关节细胞、炎症细胞、小血管、巨噬细胞以及神经丛中相关细胞核的横切面。而由于小儿身体正处于生长发育阶段，相关神经节细胞发育不太完整和成熟，粘膜下层神经细胞的发育和生长也需要较长时间，这给以上鉴别带来一定的困扰。病理技术中HE染色还不能完全识别那些未发育成熟，相关结构也具备典型特征的神经节细胞，而使用相关的乙酰胆碱酯酶组织化学的病理技术方法来进行检测，其相关的阳性率过高，有可能出现误诊，同时也受到一定的冰冻限制。病理技术常常使用相关免疫组织学来进行该病的诊断，Cathepsin D染色的诊断方法也是一种诊断率较为准确的辅助检测方法，但是所表现出来的阳性率却存在一定的不足。 　　在免疫组织学检测方法中，FPG9.5是一种蛋白基因产物9.5的简称，属于一种可实现神经染色的独有神经元标记物，这种标