凝集、沉淀反应.pptVIP

凝集、沉淀反应 实验目的 1 掌握直接凝集反应的原理意义及操作方法 2 了解双向琼脂扩散试验的原理意义及操作方法 实验内容 1 直接凝集反应玻片法 2 双向琼脂扩散试验 实验原理 直接凝集反应：颗粒性抗原悬液与其相应抗体，在有适量电解质的环境中，两者直接特异性结合，进一步凝集成肉眼可见的凝集块。 沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体特异性结合，两者比例适当并有电解质存在及其一定的温度条件下，经一定的时间，可形成肉眼可见的沉淀物，在琼脂板上双方结合出现白色沉淀线。 实验用品 琼脂板，打孔器，酒精灯，毛细吸管，诊断血清，对照抗原，待检血清，湿盒，37℃温箱，双凹玻片，伤寒诊断血清，生理盐水，待检菌液等。 实验方法 直接凝集反应玻片法 1 先标记双凹玻片，两侧分别为1，2号，在1号凹内加入伤寒诊断血清1滴，在2号凹内加入生理盐水1滴。 2 分别加入待检菌液于两凹内各1滴 3 摇动混匀2分钟，观察结果 双向琼脂扩散试验 1 铺板：将溶化之1﹪琼脂5ml铺于洁净玻片上。 2 打孔：在琼脂板上打7个孔。 3 封底：把琼脂板通过火焰三次。 4 加样：把抗体1滴加于中央孔，把对照抗原加于上下两孔 （6点，12点），把待检血清（肝癌病人血清）加于右侧孔内， 左侧孔留作空白对照。 5 孵育：将加样后的琼脂板放在湿盒内，放入37℃温箱孵育24h，取出观察结果。 实验结果与分析： 1直接凝集反应玻片法：1号凹内出现凝集颗粒，2号凹内均匀混浊不出现颗粒。 2 双向琼脂扩散试验：两对照抗原孔和抗体孔之间出现白色沉淀线，待检血清孔（2点，4点）和中央抗体孔之间亦出现白色沉淀线为阳性反应 实验注意事项： 1直接凝集反应玻片法摇动玻片时不要把两凹内液体混在一起。 2双向琼脂扩散试验要注意加样要加满而不溢出为止。 作业 1 写出实验报告 2 分析凝集反应的结果和意义 3 绘出双向琼脂扩散试验结果图 * * *