真武汤对帕金森小鼠模型治疗作用设计实验.docVIP

真武汤对帕金森小鼠模型的治疗作用设计实验班级： 真武汤对帕金森小鼠模型的治疗作用设计实验班级：中西医1001姓名：徐冲 学号: 102304128中西医1001 徐冲 学号：102304128设计思路：帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是老年人常见的一种神经退行性疾病。该病主要病理特征是中脑黑质多巴胺神经元变性坏死，其内含的酪氨酸羟化酶显著减少，使的多巴胺生成困难，从而使纹状体分泌的多巴胺含量下降。临床以肌强直，震颤和运动功能障碍为主要症状。现在，MPTP(1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶)是最重要和使用最广泛的PD动物模型产生物[1]。它有着其他模型所不具有的一些独特优势，比如它能特异性地损毁多巴胺神经元的结构，其诱导产生的症状与人类PD非常相似。建立帕金森小鼠模型，分成三组：一组为对照组，两组为帕金森模型组。模型组一组不干涉，另一组注入真武汤。通过行为学实验，结果经过统计学处理，得出真武汤对帕金森小鼠模型是否有治疗作用。（二）目的和原理目的:研究中药汤剂对帕金森小鼠模型治疗作用真武汤治疗帕金森理论基础：“太阳病，发汗，汗出不解，其人仍发热，心下悸，头眩，身瞤[rún]动，振振欲擗地者，真武汤主之”[2]。其中,“身瞤动，振振欲擗地者”，也就是肌肉跳动与整个身体在振动中的倾斜度。与帕金森的临床表现:静止性震颤、运动迟缓、肌强直和姿势步态障碍极为相似。（三）实验对象: C57BL小鼠，雄性，8周龄，体质量20~22g,由扬大医学院提供。（四）器材与药品：药品：1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP），二丙苯磺胺（Probenecid），真武汤（茯苓 三钱9g 芍药 三钱9g 白术 二钱6g 生姜 三钱9g附子 炮去皮，一枚，破八片9g。上五味，以水八升，煮取三升，去滓，温服七合）器材：疲劳转棒仪（Rotarod）注射器（20ml，5ml，1ml）（五）步骤与观察: 1.模型建立：小鼠54只(18只一组)，随机分为对照组与模型组1与模型组2。共进行10次MPTP注射，每次持续5周，对照组每次在腹腔注射Probenecid（250mg/kg）,30min后均在皮下注射生理盐水。模型组1和模型组2每次则先腹腔注射Probenecid（剂量同对照组），30min后皮下注射MPTP，剂量为15mg/kg[3]。且模型组1皮下注射生理盐水15mg/kg,模型组2皮下注射真武汤15mg/kg。最后一次给药4周后开始行为学测定对照组模型组1模型组2注射Probenecid是是是30min后注射生理盐水MPTP、生理盐水各15mg/kgMPTP、真武汤各15mg/kg2. 行为学实验（Rotarod实验）：参照lau等[4]的实验方法，略加修改：最后一次MPTP注射后过一周开始行为学实验，以不同的转棒旋转速度下小鼠在转棒上停留的时间来表征小鼠的行为学活性。共有9个递增的旋转速度（8,10,12,14,16,18,20,23,25rpm），每个速度的测量时间为150s。以动物在转棒上停留的时间对相应的转速作图。对于每一只动物，其累计的运动活性得分都被计算和表达成曲线下的面积。每一周或者两周进行一次行为学观察，持续6周[5]。停留时间810121416182325对照组模型组1模型组2 3. 采用SAS统计软件包进行统计学处理，数据用均数±标准差表示，采用团体t检验分析（六）结果猜想: 在各组中，动物在转棒上的行为学表现都是不均一的，但是，对于单个动物来说，其行为学得分却长达数周持续稳定。实验中每个组都使用了比较多的样本，以减少组内差异。在最后一次注射MPTP 2周后进行的首次行为学测验中，对照组与模型组1和2即有显著差异。，并且这种差异在往后的6周5次测验中一直保持稳定。随着转速的增加，模型组小鼠在转棒上停留的累积时间与对照组相比更短。但服用真武汤的模型组2比未服用真武汤的模型组1在转棒上停留的累积时间要长。（七）讨论：对于帕金森病的治疗，有些学者从肝、从风论治；有些从肝肾不足、气血亏虚的角度来滋补肝肾、补益气血；也有学者从痰、热、血瘀的角度。以上治法均取得一定的疗效。而真武汤则从水治。此为阳虚水泛，阳虚失于温养，水气浸渍四肢经脉，故见肌肉颤抖。 真武汤方由炮附子、芍药、茯苓、白术、生姜组成。方中炮附子温振少阴阳气，肾阳复则下焦气化启动，自能蒸腾水邪，使水有所主；白术苦温燥湿，健脾制水，使水有所制；茯苓淡渗利水，佐白术健脾，脾机运转，则水湿下渗；生姜宣散水气，助附子布阳；芍药活血脉、利小便。五味合用，共奏温阳利水之功[6]。(八)结论：真武汤对帕金森小鼠模型有治疗作用。参考文献:von Benlen u,Halbach o.Modeling neurodegen