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病理HE切片制作常见问题几处理方法 　　摘要：目的：探索病理HE切片常见的质量问题， 并提出相应的预防和处理方法， 提高 HE 切片质量。方法：回顾性地复习一定时期内本科所有的病理 HE玻片，按照病理 HE玻片中出现的质量问题进行总结、分析和分类， 然后归纳。结果：病理 HE切片常见的质量问题基本上都是由于病理技术员经验不足、操作不当 、责任心不强所造成。结论：应加强从业病理技术员的系统而严格的工作培训， 病理技术员要积极主动认真地工作， 积累工作经验， 端正工作态度， 寻找出现质量问题的根源， 提高 HE切片的质量水平。 　　关键词：病理HE切片；常见问题；处理方法 　　【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-3783（2012）10-0152-01 　　苏木精 （Hamtatoxylin）-伊红 （Eosin）染色法， 简称 HE染色法， 是生物学和医学的细胞与组织学最广泛应用的染色方法。HE染色法是病理组织制片工作中一项最基本、最常用的技术方法， 广泛应用于临床病理诊断、教学和科研工作中。由于一些病理技术人员未经过严格而系统的工作培训，工作中经验不足， 操作不当， 常出现切片脱落、染色不均匀， 模糊不清、皱褶及细胞核浆对比不明显等现象而影响诊断。容易造成误诊或漏诊， 甚至酿成医疗事故。因此， HE切片质量的好坏直接影响病理诊断、教学和科研的准确性。在 HE制片的过程中， 要不断地总结、分析病理 HE切片常见的质量问题， 积累工作经验， 端正工作态度， 提高 HE切片的质量水平， 为病理诊断、教学和科研的准确性提供可靠的科学依据。 　　1材料与方法 　　1.1材料：随机选择2011 年 1月至 2012年 1月我病理科存档的 HE玻片 1000张。 　　1.2采用双盲法：由5个有经验的病理医生和病理技术员按肉眼观察和镜下观察二种方法随机单独阅片， 将 1000张玻片中每一张所出现的质量问题进行列举， 然后统一分类、总结和归纳。 　　2结果和处理办法 　　2.1肉眼观察结果：（1）切片褶皱、脱落。（2）组织有刀痕及残缺不全。（3）染色不均匀， 模糊不清。（4）有搓衣板样改变。（5）组织有污染及龟裂。 　　预防和处理办法：（1） 购买的玻片的质量要好，干净、无异物。（2） 中性树胶浓度要适宜， 树胶过浓， 封片时容易出现空泡或树胶不能覆盖整张切片而组织切片干涸， 影响病理医生的观察， 树胶过稀， 封片时树胶外溢， 影响外观。其次， 干涸的组织细胞核透明不良， 细胞核变黑； 出现搓衣板样改变的现象一般都是由于组织太硬、脱水过度或切片更换不及时； 也可能是由于切片机的零件松动造成的。因此， 切片前要把切片机的有关螺旋拧紧， 没有拧紧或包埋的蜡块过硬时就会出现搓衣板样改变的现象。同时， 调整刀锋与蜡块的适宜角度，； 组织残缺不全是由于切片时修整蜡块时深度都不够、组织没有全部暴露于切面；切片的刮划痕迹是由于切片刀的刀锋有缺口或者是包埋的组织有异物、钙化组织、骨组织及包埋石蜡有沙粒造成的。因此， 切片时必须在修整蜡块时保证组织块全部暴露于切面； 保证切片刀的锋利没刀口，及时更换切片刀； 同时在组织取材时去除手术异物和钙化组织； 骨组织要完全脱钙。这样可以保证切片的完整和平整美观； 组织龟裂是由于烤片时温度过高，放置在烤箱的时间过长， 切片急速受热切片过度伸张引起的； 由于展片的水有异物而污染切片。因此， 贴片用的水要勤换， 防止异物污染，这里要极其重视，因为很容易造成误诊； 同时， 切片在空气中略干燥后烤片， 烤箱温度为 65e 为宜， 烤切片时间 15～30 min为宜。对于脑组织切片必须待切片完全晾干后才能烤片。 　　2.2镜下观察结果 　　2.2.1脱蜡不干净， 可见片状或点状发白；染色失效， 细胞核与细胞浆对比不清； 切片过厚， 细胞核模糊不清； 透明不够或有水份， 切片模糊不清；切片伸展不平， 出现地图纹或鸡爪纹； 切片有异物污染或苏木素沉渣污染。 　　2.2.2预防和处理办法：（1）石蜡切片必须经过脱蜡才能染色， 脱蜡的好坏取决切片的温度和二甲苯的温度及液体的新旧程度。 当温度过低时可以稍给予二甲苯加热，及时更换二甲苯。否则， 由于切片中石蜡或二甲苯的?留， 染色剂与细胞不能有效接触而不着色， 导致切片出现片状或点状发白；（2）由于苏木素染液和伊红染液多次使用而变得?旧， 细胞核与细胞浆不易上色而导致染色失败， 细胞核与细胞浆对比不清， 所以苏木素染液和伊红染液要经常更换， 保持染液有效。同时切片经苏木素染液染色时间不能太长， 染色后在水中停留太长时间会使染色质变蓝， 即使用盐酸酒精分化都不能把蓝色除去， 切片会变得一片蓝， 细胞核与细胞浆模糊不清， 对比不明显。因此， 苏木素染色时间要适宜， 一般浸染