滨蒿内酯和泽兰内酯在云南石斛物种中分布.docVIP

滨蒿内酯和泽兰内酯在云南石斛物种中分布 　　[摘要] 研究以HPLC测定滨蒿内酯和泽兰内酯，调查37种石斛中滨蒿内酯和泽兰内酯的分布式样。其中，对球花石斛按年龄采集假鳞茎，进行滨蒿内酯和泽兰内酯的含量测定。分析表明，滨蒿内酯和泽兰内酯在石斛属中分布差异较大，只有球花石斛和密花石斛含有滨蒿内酯和泽兰内酯，美花石斛中含有少量泽兰内酯。滨蒿内酯和泽兰内酯的含量随球花石斛植株变老有递减的趋势。HPLC简便、快速、准确、重复性好，适用于分析药用石斛中滨蒿内酯和泽兰内酯的含量。 　　[关键词] HPLC；滨蒿内酯；泽兰内酯；石斛 　　[收稿日期] 2013-03-14 　　[通信作者] 虞泓*，博士生导师，Tel： （0871Fax： （0871E-mail： herbfish@163、com，hongyu@ynu、edu、cn 石斛为兰科Orchidaceae石斛属Dendrobium Sw、 植物，全世界兰科约有500属，15 000多种；石斛属是兰科中最大的属之一。我国石斛属植物有74种2变种，周荣汉在其主编的《中药资源学》称：“石斛属植物以云南所有的种为最多，共计39种。”石斛为多年生附生性草本植物，常附生于密林树干或岩石上，并常与苔藓植物伴生[1]。由于近年对野生药用石斛的过度挖掘，使其处于濒危状态。 　　滨蒿内酯又名6，7-二甲氧基香豆素、七叶内酯二甲醚，具有平喘止咳、利胆、消炎镇痛、降血压、调血脂、舒张血管和免疫抑制、抗辐射等功效，一般用于治疗支气管哮喘、冠心病和心绞痛等症。研究表明，滨蒿内酯对ASMCs[Ca2+]具有强大而持久的降低和免疫调节作用[2]。此外，还能抑制磷酸组织胺（His）和咖啡因（caffeine）对气管平滑肌Ca2+浓度的升高作用[3-4]。通过腹腔注射滨蒿内酯，可明显减轻哮喘豚鼠支气管炎症[5]。又有研究指出，滨蒿内酯可通过调节因白细胞介素4（IL-4）与干扰素γ（IFN-γ）失衡导致的Ig E异常合成，从而抑制哮喘的发生[6-9]。目前，哮喘发病率在全球范围内呈上升趋势。滨蒿内酯具有显著的抗哮喘作用，对于开发呼吸系统疾病新药意义重大。 　　滨蒿内酯对心血管系统也有重要的调节作用。杨海玲等[10]发现滨蒿内酯能舒张血管平滑肌。对高血脂糖尿病模型兔进行试验表明，滨蒿内酯可降低血脂中胆固醇的含量，使大动脉表面肉眼可见的胆固醇覆盖面积降低30%、厚度减少17%，从而减慢动脉粥样硬化的进程[11]。Huh等的研究证实，滨蒿内酯能抑制黄嘌呤氧化酶的活性，起到保护肝脏免受外界致癌物毒害的作用。滨蒿内酯能促进PC12 细胞中多巴胺的释放，并可诱导多巴胺的生物合成及神经突触的生长[12-13]。研究还发现，滨蒿内酯可作为敏感指示剂用于鉴别细胞色素P450 酶的不同亚型[14]，并且具有抗辐射[15]，控制血糖[16]，激发黑色素的生成[17]等作用。滨蒿内酯来源广泛，人工合成简便，因此有着广泛的临床应用前景。目前，滨蒿内酯已成为脉络宁注射液的有效成分之一[18]，能抑制血小板的聚集，从而使血栓形成延迟及减少血栓重量，具有抗血栓作用[19]。 　　滨蒿内酯与泽兰内酯的分子式分别为C11H10O4和C15H20O3。滨蒿内酯与泽兰内酯含量测定的方法有激光共聚焦法[20]、反相高效液相色谱法[21]、薄层扫描法[22]等，所测定的材料一般为生药或制剂。张光浓等[23]对球花石斛D、thyrsiflorum Rchb、f的滨蒿内酯和泽兰内酯含量进行了测定，张蕾等[24]对4种石斛的滨蒿内酯进行了检测，但系统检测石斛属多种植物中滨蒿内酯和泽兰内酯的分布式样未见报道。本研究试图建立HPLC测定37种石斛中滨蒿内酯和泽兰内酯的含量，揭示石斛属植物中滨蒿内酯和泽兰内酯的分布式样。为石斛的GAP标准制定、引种驯化、繁育栽培、育种选种，以及石斛药用资源可持续利用与保护，提供化学成分依据。 　　1 材料 　　Waters高效液相色谱仪，600泵，996二极管阵列检测器，717自动进样器，色谱柱恒温装置，Millennium32软件。 　　滨蒿内酯和泽兰内酯对照品均由购自中国食品药品检定研究院，纯度≥98%，所用溶剂均为分析纯，流动相为色谱纯。 　　37种石斛材料由中国科学院植物研究所陈心启教授鉴定。 　　2 方法与结果 　　2、1 检测波长及色谱条件 检测波长的选择 经对滨蒿内酯的紫外吸收光谱的测定，其吸收峰波长分别为343、4，295、9，229、8 nm，因229、8 nm与溶剂的末端吸收较接近，而343、4 nm处的吸收系数比295、9 nm处的大，且泽兰内酯在此处也有强吸收，故选择343 nm作为检测波长[25]。 　　色谱条件 Waters Symmetry C18色谱柱（4、6 mm×