红景天、蛹虫草、大黄配伍治疗代谢综合征实验研究Ⅵ.docVIP

红景天、蛹虫草、大黄配伍治疗代谢综合征实验研究Ⅵ 　　[摘要] 探讨红景天、蛹虫草、大黄配伍（中药复方FF）对1型糖尿病大鼠肾脏的保护作用。采用链脲佐菌素诱导SD大鼠形成1型糖尿病模型，按禁食血糖水平随机分为模型对照组（Model）、胰岛素组（insulin）和FF治疗组。动态监测动物血糖、血脂水平和肾功能变化；10周后检测氧化应激水平。结果显示，连续给予中药复方 FF 能够明显降低1型糖尿病大鼠血糖、血脂水平；降低肾脏指数，降低血尿素氮水平、增加尿肌酐排出，降低尿酶活性和尿蛋白水平；使血清和肾脏中SOD活性升高、MDA含量降低。说明中药复方FF对1型糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用，其机制可能与其降糖调脂、改善机体微循环及氧化应激水平等作用有关。 　　[关键词] 中药复方FF；糖尿病肾病；动态监测；氧化应激 　　[收稿日期] 2013-08-15 　　[基金项目] 国家“重大新药创制”科技重大专项（2009ZXJ09103-432，2012ZX09103-101-063，2012ZX09301-002-004） 　　[通信作者] 叶菲，Tel：（010E-mail：yefei@ 　　[作者简介] 付健阳， E-mail：rr0543124@126.com 　　糖尿病肾病（diabetic nephropathy， DN）是常见的糖尿病并发症之一，是由于高血糖及高血脂所致的一系列代谢紊乱及血流动力学改变而导致的肾小球硬化症。中草药在糖尿病肾病治疗中具有一定的疗效。红景天可降低血糖，调节脂质代谢，并具有抗氧化应激和胰岛细胞保护作用，进而发挥糖尿病肾病保护作用[1]；蛹虫草具有降血糖，改善肾脏滤过功能，减少胶原物质在肾脏中的积累的作用[2]；大黄可以通过降低血脂水平，改善肾小球肥大及细胞外基质增生[3]。本研究以红景天为主要组分，配伍大黄和蛹虫草组成中药复方FF，在前期对其进行的降糖调脂改善微循环等研究基础上[6-8]，进一步探讨中药复方FF对1型糖尿病（type 1 diabetes mellitus， T1DM）大鼠肾脏的保护作用，为中药治疗DN提供新的思路。 　　1 材料 　　中性胰岛素注射液购自美国LILY公司；链脲佐菌素（streptozocin， STZ）购自Sigma公司；总胆固醇（total cholesterol，TC）试剂盒、甘油三酯（triglyceride，TG）试剂盒购自中生北控生物科技股份有限公司；肌酐（creatinine，CRE）试剂盒、尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）试剂盒购自北京北化康泰临床试剂有限公司；N-乙酰-β-D氨基葡萄糖甘酶（N-acety-beta-D-glucosaminidase，NAG）、碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，ALP）试剂盒购自上海太阳生物技术有限公司；糖化血清蛋白测定试剂盒购自上海名典生物工程有限公司；丙二醛（malondialdehyde，MDA）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）试剂盒购自南京建成生物工程研究所；大鼠尿微量白蛋白ELISA试剂盒购自美国BD公司；考马斯亮蓝蛋白显色液购自美国Bio-Rad公司。其他试剂均为分析纯，购自北京北化精细化学品有限责任公司。 　　2 方法 　　2.1 动物模型建立及分组 雄性7周龄SD大鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号SCXK （京） 2007-001。适应性饲养1周后，腹腔注射STZ 55 mg?kg-1（0.1 mol?L-1柠檬酸盐缓冲液，pH 4.7，4 ℃）。5 d后测定禁食血糖，选择血糖值≥16.7 mmol?L-1的动物作为糖尿病大鼠模型。根据禁食血糖水平将糖尿病大鼠分为3组（n=12）：模型对照（Model）组灌胃给予0.5% CMC-Na，胰岛素（insulin）组皮下注射中效胰岛素2 U?d-1，治疗（FF）组灌胃给予中药组方FF 400 mg?kg?d-1。取6只同批大鼠作为正常对照（Con）组，腹腔注射同体积溶剂柠檬酸缓盐冲液。 　　用东芝全自动生化仪测定禁食血糖、血清甘油三脂、总胆固醇、血清肌酐、血清尿素氮以及尿肌酐。采用对硝基酚法测定尿NAG酶活性，ALP酶活性。采用硝基四氮唑蓝 （NBT）比色法测定糖化血清蛋白；考马斯亮蓝法测定尿蛋白含量，ELISA试剂盒测定尿白蛋白含量，计算尿白蛋白排泄量、尿白蛋白肌酐比率。第11周断头处死大鼠，计算肾脏指数，分别用代巴比妥酸法和黄嘌呤氧化酶法测定血清及肾的MDA含量和SOD活性。按下列公式计算内生肌酐清除率（creatinine clearance rate，Ccr）、尿总蛋白排泄量 （urine protein excretion， UPE