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低温胁迫对油茶苗抗寒性影响 　　摘要：以大别山1号油茶（Camellia oleifera Abe1.）容器苗为试验材料，研究在25、10、0和-10 ℃处理下，叶片丙二醛（MDA）含量、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性以及可溶性糖含量的变化。结果表明，随着处理温度的降低，油茶幼苗叶片MDA含量和POD、CAT活性以及可溶性糖含量变化幅度逐渐增大。25 ℃处理下，随处理天数延长，油茶幼苗叶片MDA、可溶性糖含量及CAT、POD活性均无明显变化；10 ℃和0 ℃处理4 d后，MDA和可溶性糖含量与25 ℃处理下相比分别增加了85.81%、180.43%和32%、92%，随处理天数延长，CAT和POD活性呈下降趋势，CAT活性分别降低了33%和40%，POD活性则分别降低14%和47%；-10 ℃处理下，随处理天数延长，油茶幼苗叶片MDA含量急剧增加，增幅达319.47%，可溶性糖含量则先增加后停止增长，增幅为47%，而CAT和POD活性不断下降，降幅分别为90%和71%。遭受10～0 ℃范围内的低温胁迫处理，油茶幼苗尚能形成低温适应机制，以抵御低温对苗木带来的伤害；而遭受-10 ℃及以下低温处理时，油茶幼苗机体代谢机能则几乎失去平衡。 　　关键词：油茶（Camellia oleifera Abe1.）；低温胁迫；丙二醛（MDA）；保护酶；可溶性糖 　　中图分类号：S794.4 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）03-0609-04 　　油茶（Camellia oleifera Abe1.）是世界四大木本油料树种之一，也是中国特有的优良食用油料树种[1]。油茶适宜温暖湿润的气候条件，要求年平均气温在14～22 ℃之间[2]，主要分布在中国南方17个省、市（自治区）[3]，其中安徽省大别山地区是油茶的重点产区之一， 也是油茶的边缘产区[4]。油茶要求1月平均温度不低于3 ℃，所以该地区油茶林冬季易遭受低温冻害，轻则使其减产，重则致使整片油茶林死亡，造成巨大的经济损失。目前对油茶抗寒性的研究主要集中在优良抗性品种的选育和冬季有效的防寒措施等方面，对于油茶容器苗抗寒性生理的研究较少。 　　关于植物的抗寒性，自由基伤害学说[5]认为逆境胁迫会促进活性氧产生，活性氧过剩的毒害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，损伤膜系统，作为膜脂过氧化产物，MDA含量的变化是质膜损伤程度的重要标志之一[6]。有些酶如过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）等可清除活性氧自由基， 从而防止自由基的毒害， 为此将它们称为保护酶系统[7]。植物体内可溶性糖的积累则与细胞的渗透压有关，提高渗透浓度，降低水势，增强保水力，通过调节渗透浓度来启动脱落酸的形成，诱发蛋白质的合成，增加抗寒性。因此植物体内可溶性糖水平的提高对其抵抗低温胁迫至关重要[8]。人们曾根据这一理论对低温胁迫下的杉木[9]、紫花苜蓿[10]、水稻[11]、葡萄[12]等的抗寒机理进行了研究。为此，试验对低温胁迫下油茶幼苗叶片中MDA、保护酶及可溶性糖等指标进行了测定，以期为油茶苗圃管理和冬季抗寒实践提供理论指导。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　试验选取二年生的大别山1号油茶容器苗，将容器苗连容器袋移入高25 cm且底部有孔的塑料容器中，待幼苗适应20 d后，将幼苗分为4组，分别置于25、10、0和-10 ℃人工气候箱内进行处理。处理0、2、4 d时分别取第2～3片真叶测定幼苗各项生理参数，并将0 d处理组作为对照组。 　　1.2 方法 　　1）POD活性的测定。取2.0 g叶片（鲜叶，文中其他地方同），加入5.0 mL 62.5 mmol/L（pH 7.8）的磷酸缓冲液（内含适量PVP）于冰浴上研磨，于4 ℃、15 000 g离心20 min，上清液为酶液，POD活性的测定采用愈创木酚显色法[13]。 　　2）CAT活性的测定。取0.3 g叶片，加入62.5 mmol/L的磷酸缓冲液30 mL研磨提取酶液，使用过氧化氢反应法测定CAT活性[14]。 　　3）MDA含量的测定。取0.5 g叶片，加入pH 7.5的50 mmol/L磷酸缓冲液10 mL，于冰浴中研磨提取，采用硫代巴比妥酸反应法测定MDA含量[15]。 　　4）可溶性糖含量的测定。按张志良[16]的方法测定可溶性糖含量。 　　1.3 数据统计分析 　　数据采用DPS 9.0软件和Excel 2007进行分析。所列各值为参试油茶样品在同一时间同一温度处理下的平均值，取5株进行重复试验。 　　2 结果与分析 　　2.1 低温胁迫对大别山1号油茶幼苗叶片MDA含量的影响 　　图1中25 ℃下的数据表明，未受低温胁迫的油茶幼苗叶片MDA含量随处理时间的延长无明显变化。0、10与-10 ℃低温处理下，