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植物无糖培养技术
大型植物无糖培养装置 洁净植物无糖培养室 植物无糖组织培养技术改革了传统的用糖和瓶子作为碳源营养和生存空间的技术方法,增加了植物生长和生化反应所需的物质流的交换和循环,促进植株的生长和发育,实现了优质苗低成本的生产。 二、植物无糖组培快繁技术的优势 1) 通过人工控制动态调整优化植物生长环境,为种苗繁殖生长提供最佳的CO2浓度、光照、湿度、温度等环境条件,提高植株的光合速率,促进了植株的生长发育,苗齐、苗壮。例如:康乃馨(Kozai,1988),烟草(Fujiwara,1993),马铃薯(Heo,1999),咖啡(Nguyen,1997),西红柿(Kubota,2000),等等。 2) 继代与生根培养过程合二为一,培养周期缩短了40%以上。3) 大幅度减少了植物微繁殖生产过程中的微生物污染率。 培养基中除去糖以后,微生物失去了最佳繁殖的营养条件,污染的机率减少。由此极大?地减少了植物的损失;并可减轻工人工作的劳动负荷,从而提高劳动生产率;降低生产成本。 在无糖培养中,可以允许一些有益的微生物存在,只有它们不是病原菌。 4) 消除了小植株生理和形态方面的紊乱,种苗质量显著提高。 通过人为的环境控制来为小植株的生长提供各种适宜的光照、温度、湿度、CO2、营养、促进容器内空气的流通速度等生长条件,并且可以不使用激素或只使用很少的激素,因此,在无糖培养微繁殖中,小植株生理和形态发育正常。 5) 提高了植株的生根率和生根质量,特别是对于木本植物来说,极大地植株的生根率和生根质量,试管苗移栽成活率显著提高。 情人草和马铃薯小植株在容器内培养和移植到温室驯化后的成活率得出:马铃薯的最终成苗率,在无糖培养的条件下是96%,在有糖培养的条件下是72%,情人草在无糖培养的条件下是91%,在有糖培养的条件下是62%。 6) 节省投资,降低生产成本。与传统的微繁殖技术相比,种苗生产综合成本平均降低30%。7) 组培生产工艺的简单化,流程缩短,技术和设备的集成度提高,降低了操作技术难度和劳动作业强度,更易于在规模化生产上推广应用。8) 培养不受培养容器的限制,可实现穴盘苗商业化生产,也可实现大规模容器自动工厂化生产。 只需用一个非常简单的微繁殖基础上的穴盘苗生产系统,便可进行穴盘苗商业化生产。 植物(海棠)无糖培养与常规培养的试验对照 1) 需要相对复杂的微环境(容器内环境)控制的知识和技巧实际应用还是受到一定的限制,原因就是需要应用微环境控制方面专业的技术。没有充分理解容器中小植株的生理特性,容器内的环境,容器外的环境,培养容器的物理或构造特性之间的关系,将不可能成功地应用光自养微繁殖系统,使用最少的能源和原料生产高品质的植株。光自养微繁殖控制系统的复杂性会导致设施设计的失败,必须在充分认识和理解了光自养微繁殖的原理后,才能取得成功。 三、植物无糖组培快繁技术的限制因素 2) 培养的植物材料受到限制与一般的微繁殖相比,光自养微繁殖需要较高质量的芽和茎,外植体需具有一定的叶面积,带绿色子叶的体细胞胚也可进行光自养生长。外植体的质量越好培养效果越佳。 四、植物无糖组培快繁技术研究进展 1.在植物无糖组织快繁技术的应用中,CO2的供给和浓度的调控是其关键技术之一。 CO2补充方式:是在密封的容器上使用透气膜,通过自然换气方式提供小植株光合作用所需的CO2。随着无糖组织培养培养容器的不断增大,强制性换气系统得到了应用。与自然换气相比,强制性换气具有CO2浓度容易控制,操用方便,植物生长发育加快等特点。 2.在植物无糖组织培养中,培养基质对试管苗生长来说也是一个非常重要的因素。Afreen-Zobayed等(1999)对甘薯进行了琼脂、gellan gum、蛭石、cellulose和Florialite等五种不同培养基质的无糖培养比较试验,研究结果表明,以Florialite为培养基质生产的试管苗质量优于以琼脂作为培养基质产生的试管苗,其中叶、根鲜重分别是后者的2.4和2.9倍,干重分别是后者的2.2和2.8倍,试管苗净光合速率最高。 3.光量子通量、培养容器换气次数等环境因子均对试管苗生长产生影响。 到目前为止,植物无糖组织快繁技术已经在60余种植物中获得成功。与有糖培养相比,无糖组织培养技术显示出其特有的优势。特别是对于木本植物来说,无糖组织培养技术能显著改善根的质量,提高生根率,消除了小植株生理和形态方面的紊乱,种苗质量显著提高。 无糖组织培养微繁殖技术作为一项高新技术,在基础科学研究和实践生产中均具有广阔的应用前景。1.在无糖组织培养过程中,主要是通过环境调节来促进试管苗生长。因此,可以从环境调节角度来研究试管苗形态建成、生长发育机理等方面的基础科学研究。2.无糖组织快繁技术可有效解决藤木、木本植物生根难的问题,可进行这方面的
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